方向性冰晶低温试验台研究.pdfVIP

文章编号：CAR084 方向性冰晶低温试验台研究 郝保同 刘宝林 戎森杰 林萍 王欣 （上海理工大学生物热科学研究所，上海 200093 ） 摘 要 在细胞的冻结保存过程中，冰晶损伤是导致细胞死亡的主要因素之一，如何减小冰晶的损伤是细胞成功保存的关键。 本文研制的方向性冰晶实验台可以改变冰晶的形态，为研究细胞的冰晶损伤提供了工具。用方向性冰晶实验台冻结不同浓度 的MeSO2 保护剂，并用显微镜观察在不同降温速率下冰晶生长情况，结果表明，影响冰晶结构形态的主要因素是冷却速率 和浓度，随着冷却速率的增大，冰晶变的细而尖；随着浓度的增大，冰晶的尺寸也变大。 关键词 低温显微镜 冰晶 低温保护剂 低温台 Hao Baotong Liu Baolin Rong Senjie Lin Ping Wang Xin (Institute of Biothermal Science, University of Shanghai for Science and Technology, 200093, Shanghai ) Abstract Ice damage is one of the factors that causes cell death in the cryopreservation process. This paper developed a directional ice formation cryostage to study the ice damage to cells. Various MeSO2 solutions were frozen on the cryostage. The ice was inspected by a microscope and recorded by a digital camera. It was shown that the size and structure of ice were affected by cooling rates and concentration of the solution. The ice became fine and sharp with the increment f cooling rates, and the size became larger with the increment of concentration. Keywords Cryomicroscope Ice Cryoprotective agents Cryostage 低温保护剂、优化升降温速率等方面做了大量的工 作[6-9]，Rubinsky 等在冰晶的定向生长方面做了一些 1 前言 研究[10-12]，并且设计了控制冰晶生长的装置，假定 冻结保存是一种普遍应用的生物材料保存方 样品和低温台的温度在空间分布上是一致的，主要 法。在冻结保存过程中，冰晶损伤是导致细胞死亡 优点是能实现连续观察某个细胞的物理现象。然而 的主要因素之一[1]，包括“胞内冰”损伤和“胞外 冷冻生物材料样品的过程中，冷冻过程始于样品外 冰”损伤两种。“胞内冰”是由于冷却速率过快而 表面，通过固液界面传递到内部，其温度分布在空 造成的，对此人们已进行了很多深入的研究[2-5]。“胞 间上不均匀，冷冻过程中，生物样品存在温度梯度。 外冰”的形成和生长会挤压、剪切细胞，从而造成 上述低温台在个体细胞冷冻过程研究中极其重要， 细胞死亡。如何减小冰晶的损伤，是细胞、组织成 但无法模拟定向冻结过程，观察低温显微镜下的定 功低温保存的关键。本文采用方向性冰晶生长低温 向冻结过程是很重要的