自组装成环荧光显微成像技术在抗生素残留量检测中的应用.pdfVIP

第29卷，第8期 2 0 0 9年8月 光谱学与光谱分析 Spectroscopy and Spectral Analysis V01．29，No．8，pp2217-2221 August，2009 自组装成环荧光显微成像技术在抗生素 残留量检测中的应用 刘 颖h 2，冯金朝1，李 丹1，崔 箭3，徐斯凡3，申刚义3 1．中央民族大学生命与环境科学学院，北京100081 2．内蒙占师范大学化学与环境科学学院，内蒙古呼和浩特010022 3．中央民族大学中国少数民族传统医学研究院，北京100081 摘 要提出了一种基于溶剂毛细流效应的微波加热自组装成环荧光显微成像技术，并应用于内蒙古乳都 乳中抗生素残留肇检测。在六氢毗啶反应介质和聚乙烯醇一124(PVA-124)存在下，将米诺环素液滴滴在疏 水性玻璃表面上，当液滴受热挥发时，形成直径约为1．54 ITlln，环带宽为22．6 ym的自组装环。当点样体积 为0．30肛L时，线性范围为4．2×10-12～1．8×10叫1 tool·rin91(1．4×10叫～o．60×10_5 mol·L_1)，方法 的检测限(3盯)为4．2×10．13 mol·ring叫(1．4×10-7 mol·L1)。应用于内蒙古乳都乳中残留米诺环素和米 诺环素胶囊中米诺环素含虽的检测，训收率分别为97．2％～103％和99．4％～102％，相对标准偏差(RSD) 小于1．2％。该方法建市了高灵敏、高选择性的痕量药物污染物分析新方法，为内蒙古地方优势资源产 品一乳品中抗生素类药物残留量的定最枪测提供理论依据，同时时不同地区乳品中抗牛素的来源、残留 情况的系统动态研究及对乳品行业的管理、监督等具有重要的现实意义和更广泛的应用前景。 关键词米诺环素；内蒙古乳都乳；自组装成环(SOR)技术；荧光显微分析 中图分类号：X832 文献标识码：A DOI：10．3964／j．issn．1000—0593(2009)08—2217-05 引 言 近年来，在禽畜产业领域应用抗生素对动物进行诊断、 以亚治疗剂毋添加于动物饲料中预防和治疗疾病[1七]。另一 方面，随着畜牧业迅速发展，乳牛患乳房炎等疾病的概率也 随之增加，抗生素作为通用药剂被广泛添加到乳牛饲料和用 于乳牛机体注射[3]。长期暴露于低剂量抗生素环境中的微生 物、牛物、动物和人，将产生大茸耐药细菌心]，对机体健康 存在潜在威胁，同时也造成研制一种新抗生素的速度远远赶 不上细菌产生耐药性速度的局面。因此，牛奶中抗生素类药 物残留冒问题逐渐成为公众关注的焦点。我国目前国内市场 中消毒牛奶、奶粉、婴幼儿奶粉和生牛奶中抗生素超标现象 十分严莺[3“]，以至引起了人们对牛奶安全『口j题的手【{忧。同 时，我国乳和乳制品在外贸出口中常常成为外国“绿色技术 壁垒”的受害者，造成巨大的经济损失【5]。 开发高灵敏度的抗生素检测技术以解决我国当前乳和乳 制品行业面l|缶的难题已成为当务之急[6]。目前抗生素残留检 测的方法大致分为微生物测定法(如戴尔沃检测法，国标 TrC法)[7]、化学分析法(8d1及生物和化学的酶联免疫测定 法[10]等，各种方法均有不同特点。寻找一种耗样苗少、灵敏 度高的榆测新方法，仍是一项非常莺要和迫切的工作。 米诺环素(Minocycline，MC)是高效、速效、长效的半合 成四环素新制剂，抗菌作用在该属中最强。近几年对牛奶中 四环素类药物残留检测方法的相关报道主要有高效液相色谱 等方法【11’12‘。黄承志先生开发、利用的毛细流定向组装成环 技术(self-ordered ring，SOR)，已用于环境中污染无机物、 核酸和蛋白质等分析，并得到满意结果【l¨“。本文通过对实 验条件的优化，成功地将此法应用于内蒙古乳都乳和国内行 业乳品中残留米诺环素及米诺环素胶囊中米诺环素含量的检 测，回收率分别为97．2％～103％和99．4％～102％，本实验 样品前处理简单，只需将样晶稀释200倍即可，且需用最小， 微升级点样。当0．30 tzL点样时，检测限为4．2×10-13 mol ·ring一1(1．4×10—7 mol·L一1)。 本文建立了操作简单、高灵敏、高选择性的痕量药物污 染物分析新方法，为内蒙占地方优势资源产品——乳品中抗 收稿日期：2008-05—22：修订日期：2008-08—26 基金项目：国家自然科学基金项目，中央民族大学。985工程”项目(CUN 985—3—3)，中央民族大学。211工程”项目(MUC 021211306)，内蒙古自治区自然科学基金重点项目(200711020202)．内蒙古自治区高等学校科学研究项目(NJ06108)资助 作者简介：刘颖，1963年生，中央民族大学生命与环境科学学院教授 e-mail