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蛋白质代谢
? 翻译以mRNA为直接模板,tRNA为氨基酸运载体,核蛋白体为装配场所,共同协调完成蛋白质生物合成的过程。也就是把mRNA的碱基排列顺序转译成多肽链中氨基酸的排列顺序。
? 三大进展使蛋白质合成的主要过程得到认识
①蛋白质合成的部位-核糖体;②氨基酸被氨酰tRNA激活;③遗传密码子。
1.遗传密码
? 密码子是指编码一个特定氨基酸的三联体核苷酸。
? 编码连续氨基酸的密码子中没有标点。
? 起始密码子:AUG
? 终止密码子:UAA,UAG,UGA
? 阅读框和可读框
阅读框就是一个在DNA或RNA中的相邻但不重叠的三联体结构。序列中的第一个特定的密码子决定阅读框。在一条单链中有3中可能的阅读框。在50或更多的密码子中没有终止密码子的阅读框,称为可读框。
? 遗传密码的特性
①连续性;②读码不重叠性;③通用性;④简并性;⑤摆动性。
? 简并性:每一个氨基酸可能有一个以上的密码子;(甲硫氨酸和色氨酸只有一个密码子)
? 摆动性:大多数密码子的第三个碱基与其反密码子的相应配对比较松,使一些tRNA能识别多个密码子
意义:密码子和反密码子相互作用平衡了准确性和速度的需要。
? 密码子的特性
①无标点符号;②读码不重复;③一定的防突变功能。
? 碱基丢失――后续氨基酸全改变
? 一个碱基突变――一个氨基酸改变
? 密码子第三个碱基改变――氨基酸可能不变(简并性,摆动性)
? 阅读框移动和RNA编辑 ――――― 一些mRNA在翻译前就被编辑。
? 在一些病毒DNA中发现不同阅读框中的重复基因
2.蛋白质合成
? 蛋白质合成发生在核糖体中
? 核糖体是一个复杂的超分子机器。
? 细菌的核糖体含有65%的rRNA和35%蛋白质,两个亚基分别为30S和50S,形成的完整核糖体为70S。
? 细菌核糖体中的蛋白质既可以作为酶,也可以作为结构的组成部分。
? tRNA在将核酸转化为蛋白质的过程中起翻译者的作用
? tRNA具有特殊的结构特征,分子相对较小,它的单链可以折叠形成精确的三级结构
? 细胞中对应于每一个氨基酸的tRNA至少有一种;至少需要32种tRNA去识别所有的氨基酸密码子,但是有些细胞会需要32种以上的tRNA去识别所有的密码子。
? tRNA在5’端有一个鸟苷酸残基,所有tRNA的3’端都具有CCA序列。在二级结构中,所有的tRNA都是通过氢键结合而形成具有4个臂的三叶草形结构;长一些的tRNA分子会形成一个额外环。在三级结构中,tRNA分子形成倒L型的空间构象。
? tRNA中氨基酸臂能携带特定的氨基酸,反密码子臂包含反密码子。
蛋白质合成过程
第一步:氨基酸活化
? 多肽合成需要满足两个基本要求:
1. 氨基酸的每一个羧基必须活化以促进肽键的形成
2. 每一个新的氨基酸必须与mRNA上编码它的信息联系起来。
? 氨酰-tRNA合成酶使正确的氨基酸与tRNA连接,形成氨酰tRNA,反应消耗ATP,氨酰-tRNA合成酶需要Mg2+激活。
? 每种氨基酸只由一个专一的氨酰-tRNA合成酶催化;形成氨酰AMP中间体。
? 氨酰-tRNA合成酶的校对作用
? tRNA的氨酰化作用包括:
1. 活化氨基酸以形成肽键
2. 将氨基酸接在合适的tRNA上以保证氨基酸能被准确的放置于一个增长肽链末端。
结合到tRNA上的氨基酸的身份在核糖体不被检查,所以两者的正确连接对于蛋白质的合成的精确性十分关键。
? 氨酰-tRNA合成酶的校对作用:
1. 过滤氨基酸与酶的初始接合以及它被活化为氨酰-AMP;
2. 过滤不正确的氨酰-AMP产物与酶的另一个活化部位结合;
3. 水解氨酰-AMP上的氨基酸与tRNA形成的错误的酯键。
? 第二遗传密码
? 一种氨酰-tRNA不仅必须对一种氨基酸具有专一性,而且必须同时对某些tRNA具有专一性。氨酰-tRNA与tRNA的相互作用称为第二遗传密码。
第二步:起始
? mRNA与核糖体小亚基及起始氨酰-tRNA结合,然后结合大亚基,起始氨酰-tRNA与密码子AUG配对,需要起始因子催化和ATP供能。
? 问题一:甲硫氨酸如何识别起始密码AUG和中间密码AUG?
? 甲硫氨酸的载体是两种不同的tRNA。
? 在原核生物中起始的是甲基化的甲硫氨酸,tRNAfMet识别起始密码,起始氨基酸残基为N-甲酰甲硫氨酸(fMet),与tRNA形成fMet-tRNAfMet;tRNAMet识别中间的甲硫氨酸。
? 在真核细胞中,由胞浆核糖体合成的所有多肽都始于一个甲硫氨酸残基,但又有一个与mRNA内部AUG密码子的tRNAMet不同的专一起始tRNA.
? 由线粒体和叶绿体合成的多肽均始于fMet。
? 甲硫氨酸与tRNA结合,然后转甲酰酶转移一个甲基到蛋氨酸残基的氨端。
? 问题二:AUG密码子如何识别作为起始的N
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