两种检测阴沟肠杆菌AmpC酶方法的比较.pdfVIP

两种检测阴沟肠杆菌 AmpC酶方法的比较 周志慧 李兰娟 俞云松 裘云庋 马亦林 【摘要】 目的 建立一种新的简便易行的Ampc酶的表型筛选方法并对其进行评价。方法 采 用表型筛选和三维试验．对 l44株阴淘肠杆菌进行AmpC酶控测，对检测结果进行比较，并检测部分 菌株的等电点和 ampD基因。结果 144株阴沟肠杆菌表型筛选结果显示高产Am 酶的菌株共有 35株．占24．3l％(35／144)。表型筛选与三维试验相比总符合率为 89．58％(129／144)。2种方法检测 结果相反的有5株菌，其中4株菌的等电点条带均不能被氯唑西林抑制．另 1株菌株等电点检测有 5 条带(其中2条被氯唑西林抑制)。3株amoO基因阳性菌株测序结果显示均存在71，72，75位氨基酸 发生改变，其中有 2株还存在 101位氨基酸改变。结论 表型筛选法检测AmpC酶结果可靠、方法简 便，易于在临床实验室中推广应用。 【关键词】 肠杆菌，阴沟； 酶类； 表型； 三维试验 B啊喇 ∞ 加 岫 melhods for de把c血 Amt3C 叼能 p】响 。ed by 日幢朗 h 啦 r doae~ ZHOU 2hCh~，Ⅱ上d m ，lbYun．~ong， Yunqing，MA 螂加删 of14eaio~,Diseases．First瑚 Hospital，Colege ofMedicine．ZheiqangUniversity，Han~3um310003，China [Abnr~ 】 暗e删 To喊 up and evaluate a new o0n哪Iie址pb咖0坼 宴a T】gmetedto detect 山T．pc emyme MeIhD凼 l~ type宴cTe啊liI】g and 畔e_dim咖 0柚 tests w脚 抽 Iled to detect【I 144 喈 of F』魄fo eloa~．ae．AⅢpD辨Ie al1di~eleetrlc p0iⅡ恒 detectedin刚 0f stroa~． The results otpl螂l0啪Pe scIe豇ling出 w。d 35 s晡岫(24．31％)IIi y p忡dI1cedAmpc e 町惴 Ph即ob pe screening c呦 p叮 ~itlaⅡ 击m 蚰丑ltest，the eoil：eiderice rate哪 89．58％ (129／144j 5 lH}lBd q)p0 le b0e1e p l吐趾甲 of4 strains w唧 加t inl~ iml el~ ilin．TI砖 0l n had 5 i吕0d c t~int 岬 3娜 僦 inhiNted cI伽 m．m． 号e 啦出 伸 of 3 出 we陀 amil．0 acid 把瑚 瑚 in ∞ 71，72，75 101．C啊 hl 饵葛 H rD ecreeni~ is Mille to detectAm ：目∞ easyto咖 in c lab啪 加栖 ． 【K哿 】 ~ bscter c】nBc日e； EI】 懒 ； Ph印0 pe； Three血旧1si蚰al Le乩 随着抗菌药物的广泛应用，多重耐药细菌的感 染已成为临床治疗的难点。革兰阴性杆菌除了产生 超广谱口内酰胺酶(ESBI~)外，AⅡ C酶的产生已逐 渐引起I临床医师的关注?1。尤其是阴沟肠杆菌既可 产生ESBI~，又可产生Ampc酶，耐药情况极为严重。 目前 Anlpc酶尚无一种较好的简便易行的检测方 法。根据常见8内酰胺酶的特点，我们建立了一种 简便易行的 Anlpc酶表型筛选方法，采用这种方法 对临床分离的144株阴沟肠杆菌进行检测，检测结 果与三维试验进行比较．现报道如下。 材料与方法 一 、材料 基金项目：两江省教育厅科研基金资助(∞0lO榔 ) 作者单位：31~(13杭州，浙江大学医学院附属第一医院传染科 论 著 1．菌株：收集2000年 4月 ～2∞1年 6月本院、 杭州市第一人民医院、第三人民医院、浙江大学医学 院附属邵逸夫医院、嘉兴市第一人民医院和绍兴市 第二人民医院I临床分离的阴沟肠杆菌共 144株。质 控菌为高产 AⅡ c酶的阴沟肠杆菌O29N，由北京协 和医院检验科细菌室陈民钧教授惠赠。 2．药敏纸片：亚胺培南( )、头孢毗肟(FEP)、头 孢他啶+克拉维酸(cD02)、头孢噻肟(cTx)、头孢噻 肟+克拉维酸(cD03)、头孢西丁(FOX)等药敏纸片 均为OXOID公司产品．头孢硝噻吩纸片为 BBL公司 产品。 二、方法 1．．~mpC酶表型筛选：用 IP、FEP、CD02、cD03、 CTX 5种纸片进行表型筛选。判断标准：根据表型 筛选．FEP、IP表现为敏感，而 CTX、CD02和