林巧爱《医学微生物》微生物考核相关内容.docVIP

【考试内容】 一、标本观察 大体观： 1、辨认葡球：白葡、金葡、柠檬 ? 2、溶血环试验：α溶血（不完全溶血）β溶血（完全溶血）? 3、生化管： （1）单糖发酵试验： 紫（-）?? ???????? ???????? 黄（+）? ?????????????????? 黄小气泡（⊕） （2）硫化氢试验： 黑↓（+）?????? ???????? 无明显现象 （-） （3）尿素酶试验： 玫瑰红（+）? ???????? 粉红\橙（-） （4）吲哚试验：临时沿管壁加入靛基质试剂，观察培养基液面 玫瑰吲哚（+）?????? 黄色（-） 4、培养基： （1）双糖铁血琼脂培养基（KIA）： 【原理】分解乳糖的细菌斜面为黄色，分解葡萄糖的细菌底层为黄色，产生硫化氢的细菌培养基中出现黑色。此外还可以观察细菌分解葡萄糖是否产气。 KIA主要用于革兰阴性杆菌的鉴别，主要是肠杆菌科细菌的鉴别。 【鉴定】非致病菌：底层黄+斜面黄（+，+） 致病菌：底层黄+斜面红（+，-） （2）SS琼脂平板：（SS：Salmonella – Shigella ） 【原理】SS琼脂用于培养肠道致病菌，其中胆盐能够抑制G- 菌，枸橼酸钠和煌绿抑制大肠埃希菌，对志贺菌属及沙门菌属相对抑制性较弱，从而分离S-S。中性红作指示剂。 ? 【鉴定】非致病菌：红???????? 致病菌：无色、淡黄 （3）0.033%亚碲酸钾血琼脂平板--白喉杆菌：黑 ?5、半固体培养基动力试验： 有鞭毛的细菌：穿刺线呈羽毛、云雾状 无鞭毛的细菌：穿刺线明显、清晰 镜下观： 1、鞭毛： 2、芽胞（枯草芽孢杆菌） ?3、异染颗粒：（白喉棒状杆菌） 4、G-/G+ （大肠埃希菌/金葡菌） 5、钩端螺旋体 二、oil 1、加香柏油，浸入镜头 2、加大光圈，升聚光器 3、寻找目标，观察标本 4、擦拭镜头（分三步） 5、归位复原 ? PS.描述细菌：形态染色排列 三、操作：（注意无菌操作的原则！） 1、细菌接种： 四种培养基：平板、斜面、半固体、液体（相关内容参看微免实验指导） EX. 1推荐接种大肠杆菌 EX. 2平板划四区，期间烧灼接种环至少一次 EX. 3注意细节：酒精灯前操作、烧环、塞盖不离手皿 2、染色 一般步骤：加NS →取菌→涂膜→干燥固定→染色 （1）Gram’s染色： 从七八瓶试剂中辨认四种... ①初染：革兰一液（结晶紫） ②媒染：革兰二液（卢戈碘液） ③脱色：革兰三液（95%酒精） ④复染：革兰四液（稀释的石炭酸复红） ? （2）抗酸染色 （结核分枝杆菌） ①初染：石炭酸复红 ②脱色：3%盐酸酒精溶液 ③复染：碱性美兰 ? ?