2015-2016学年苏教新选修1《固定化酶的制备和应用》作业.docVIP

PAGE  PAGE 5 第二节 制备和应用固定化酶 (时间：30分钟　满分：50分) 考查知识点及角度难度及题号基础中档稍难固定化酶的制备及应用56固定化细胞技术的应用1、2、3、4、57、8一、选择题(共5小题，每小题4分，共20分) 1．下列关于固定化细胞技术的说法中，正确的是 (　　)。 A．物理吸附法的优点是操作简单，吸附牢固 B．包埋法的优点是操作复杂，条件温和，对细胞无毒性 C．物理吸附法容易对酶活性产生影响 D．凝胶包埋常用的凝胶种类有琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素、明胶和聚 丙烯酰胺等 解析　固定化细胞的主要方法有物理吸附法和包埋法。它们各有利弊，物理吸附法的主要优点是酶活性不受影响，但吸附过程相当复杂，这一过程与微生物细胞的性质、载体的性质以及两者之间的相互作用等有关，且吸附力较弱吸附不牢固，细胞容易脱落。而包埋法操作简便，条件温和，对细胞无毒性，适合于生长细胞的固定化。凝胶包埋法常用的凝胶种类有琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素、明胶和聚丙烯酰胺等。 答案　D 2．在制备固定化酵母细胞的实验中，加入硼酸—氯化钙溶液的作用是 (　　)。　　　　　　　　　　　　　　　　　　 A．调节溶液pH B．进行离子交换 C．胶体聚沉 D．为酵母菌提供钙离子 解析　海藻酸钠胶体在CaCl2这种电解质溶液的作用下发生聚沉，形成凝胶 珠，其作用机理是无机盐离子的电荷与胶体微粒电荷相互吸引，形成更大的胶体颗粒，类似于人体红细胞与凝集素之间的凝集反应。在制备固定化酵母细胞的过程中，制备CaCl2溶液用的是无水CaCl2。 答案　C 3．下面制备固定化酵母菌细胞的正确步骤是 (　　)。 ①配制饱和硼酸—氯化钙溶液　②制备海藻酸钠溶液　③海藻酸钠溶液与酵 母菌细胞混合　④酵母菌细胞活化 ⑤固定化酵母菌细胞 A．①②③④⑤ B．④①③②⑤ C．④⑤②①③ D．④①②③⑤ 解析　制备固定化酵母细胞应先加入蒸馏水进行酵母细胞活化，然后配制饱 和硼酸-氯化钙溶液，再制备海藻酸钠—酵母细胞胶液，并将其以恒定的速度滴入预先盛有50 mL饱和硼酸—氯化钙溶液的烧杯中，同时搅拌令凝胶珠形成。 答案　D 4．固定化细胞常用包埋法固定，原因是 (　　)。 A．包埋法固定操作最简便 B．包埋法对酶活性的影响最小 C．包埋法固定具有普遍性 D．细胞体积大，难以被吸附或结合 解析　因为细胞个体大，而酶分子很小，个体大的细胞难以被吸附或结合， 而个体小的酶容易从包埋材料中漏出。 答案　D 5．下列有关固定化酶和固定化细胞的说法正确的是 (　　)。 A．某种固定化酶的优势在于能催化系列生化反应 B．固定化细胞技术一次只能固定一种酶 C．固定化酶和固定化细胞的共同点是所固定的酶都可在细胞外起作用 D．固定化酶和固定化细胞都能反复使用，但酶的活性迅速下降 解析　酶具有专一性，一种酶固定后也不可能催化系列生化反应；固定化细 胞技术固定的是一系列酶；固定化酶和固定化细胞都能反复使用，若条件适宜，一般不会出现酶的活性下降问题。 答案　C 二、非选择题(共30分) 6．(13分)右图为固定化酶的反应柱示意图，其中①为反应柱，②为固定化酶，③为分布着小孔的筛板，请据图回答下面的问题。 (1)下列关于固定化酶中用到的反应柱理解正确的是 (　　)。 A．反应物和酶均可自由通过反应柱 B．反应物和酶均不能通过反应柱 C．反应物能通过，酶不能通过 D．反应物不能通过，酶能通过 (2)与一般酶制剂相比，固定化酶的突出优点是________，固定化细胞的优点 是_______________________________________________________________。 (3)③的作用是____________________________________________________。 (4)制作固定化葡萄糖异构酶所用的方式有____________或________。 (5)据图说出反应柱的作用原理：_____________________________________ _________________________________________________________________。 解析　与一般的酶制剂相比，固定化酶不仅能与反应物充分接触，还能与产物分离，并且可以反复利用。但是与固定化细胞相比，固定化酶不能催化一系列的化学反应，并且固定化细胞成本更低，操作更容易。使用固定化酶技术往往利用一个反应柱，反应柱下端有一个分布着小孔的筛板，酶颗粒无法通过筛板，而反应物溶液却可以自由出入。 答案　(1