重组干扰素、趋化因子合剂对草鱼免疫保护作用 (1).pdfVIP

第 38卷第 1期 2014年 2月 南昌大学学报(理科版) Journal of Nanchang University(Natural Science) VoI_38 No．1 Feb．2O14 文章编号 ：1006—0464(2014)01—0091—04 重组干扰素、趋化因子合剂对草鱼免疫保护作用 吴初新 ，李东明。“ ，余新 建孙，黄胜和。“ ，胡成钰 (1．南昌师范高等专科学校，江西 南昌 330103；2．南昌大学a．生命科学与食品工程学院，江西 南昌 330031； b．抚 州医学分 院，江西 抚 州 344OO0) 摘 要：草鱼细菌性和病毒性疾病严重制约着草鱼养殖生产的发展。干扰素和趋化因子为鱼类重要的非特异性免 疫因子，参与鱼类抗病毒、免疫调节等反应。在已克隆的 1个草鱼 I型干扰素基因(GU139255)和 CCL4基 因 (EU918199)的基础上 ，通过大肠杆菌表达系统分别获得了其相应的表达蛋 白。利用喷雾法将这两种蛋白分别或 混合添加到饲料中并投喂草鱼，利用攻毒实验验证这两种蛋白对草鱼的免疫保护作用。结果显示：单独添加重组 IFN或 CCL4后能有效提高草鱼存活率，免疫 21 d时其成活率分别为 63．33 和 46．67 。当同时添加重组 IFN 和 CCL4后，免疫保护效果则更为明显，21 d时草鱼存活率为 73．33 ，免疫保护率达 69．23 。而且，重组 IFN和 CCL4能够诱导内源 IFN、IRF1、STAT3、CCL4表达上调，而两者混合的蛋白诱导效果更为强烈。提示混合的 I型 干扰素和 CCL4重组蛋白可以作为一种新型鱼类免疫制剂。 关键词 ：IFN；CCL4；免疫保护 ；免疫制剂；草鱼 中图分 类号 ：Q786 文献标志码 ：A Lmmunoprotection of grass carp (Ctenopharyngodon idella)with a mixture of recombinant IFN and CCL4 against GCHV infection WU Chuxin ，LI Dongming ～，YU Xinj ian ，H UANG Shenghe ，H U Chengyu。 (1．Nanchang Teachers Colege，Nanchang 330103，China； 2a．Colege of Life Science and Food Engineering，Nanchang University，Nanchang 330031，China； 2b．Fuzhou Medical College，Nanchang University，Fuzhou 344000，China) Abstract：Bacterial or viral diseases had seriously damaged grass carp breeding industry in China．Interferon and chemokines were the important non—specific immune-related cytokines，which involved in disease resist— ance response in fish．Previously，type I IFN gene(GU139255)and CCL4 gene(EU918199)had been cloned in our laboratory．Here，we expressed IFN or CCL4 protein by E．coli expression systems．Then。 these purified recombinant proteins were sprayed and mixed into the feed．The results showed that recom— binant IFN (rCiIFN)or CCL4(rCiCCL4)alone could effectively improve the survival of grass carp．which reached 63．33 and 46．67 at 21d，respectively．After stimulation with rCilFN+ rCiCCL4。the immune protective effect was more obvious．The survival of grass carp was 7 3．3 3 ，and relative percent survival value reached 69．23 at 21d．R