建立利用萤光素酶快速检测细胞活性的方法.pdfVIP

第 ?期? 华 东师 范 大学学 报 ?自然 科学 版 ?? ??．?? ?????年 ?月? ????????????????????????????????????????????????????????? ???． ????? 文章 编 号 ：????—????????????—????—??? 建 立 利 用 萤 光 素 酶 快 速 检 测 细 胞 活 性 的 方 法? 祝静静，? 鲍秋颖，? 王宇萌，? 夏? 钢? ?华 东 师 范 大 学 脑 功 能 基 因 组 学 教 育 部 重 点 实 验 室 、上 海 市 脑 功 能 基 因组 学 重 点 实验 室 ，上 海? ???????? 摘要 ：运用 ???的方法 ，从萤火 虫萤 光素 酶基 因载 体 ?????．??扩 增 萤火虫 萤 光素 酶基 因片? 段 ，将 其 插 入 连 接 于 原 核 表 达 载 体 ??????中 ，构 建 重 组 表 达 载 体 ??????—???．经 酶 切 鉴 定 及 序? 列 分 析 后 ，将 重 组 载 体 转 化 到 表 达 菌 株 大 肠 杆 菌 ????????? 中 ，获 得 阳 性 重 组 菌 ????／? ??????????．???? 诱 导 蛋 白高 效 表 达并 通 过 镍 柱 亲 和 层 析 纯 化 萤 火 虫 萤 光 素 酶．该 目 的 蛋 白? 活 性 用 ??????—???? 试 剂 进 行 验 证 并 用 于建 立 一 种 基 于 测 量 ???含 量 的 检 测 细 胞 生 物 活 性 的? 方 法 ．与 传统 的 细 胞 生 物 活 性 检 测 试 剂 盒 ???，?????以及 ???????????比 较 ，该 方 法 具 有 反? 应 迅 速 、活力 高 、灵 敏 度 好 、生 产 方 便 的优 点 ，具 有 实 际 应 用 的潜 力 ．? 关 键 词 ：萤 火 虫 萤 光 素 酶 ；? 蛋 白表 达 ；? 蛋 白纯 化 ；? 细 胞 活 性? 中图 分 类 号 ：????．?? 文 献 标 识 码 ：?? ???： ??．????／?．????．?????????．????．??．???? ????????