高效液相色谱法测定动物组织中鱼腥草素同系物含量.pdfVIP

第 35 卷 分析化学 FENXIHUAXUE 研究简报 第 2 期 2007 年 2 月 ChineseJournaIofAnaIyticaIChemistry 297 ~300 高效液相色谱法测定动物组织中鱼腥草素同系物含量 李逐波1 叶小利2 袁吕江1 李学刚＊1 1 西南大学药学院药用资源化学研究所 重庆 400715 2 西南大学生命科学学院 重庆 400715 摘 要 以氢氧化钠水解合成鱼腥草素类药物 然后用乙醚提取 除去乙醚后 用 HPLC法测定大鼠血样和组 织样品中药物的含量 结果表明 碱水解后合成鱼腥草素 形成共轭双键的烯醇式烷酚乙醛 紫外吸收显著增 强 HPLC图谱测定物峰分离良好 血液加样标准曲线回归线性良好 rI0.999 以上 线性范围为 0.1 ~100 mg/L 标准加入回收率为 97.3% 利用该方法分析合成鱼腥草素类药物在动物血液 脑 肝 卜脏 肾脏和肌 肉等组织中的残留完全可行 关键词 鱼腥草素同系物 水解 高效液相色谱 组织残留 1 引 言 鱼腥草作为传统中药 其主要活性成分为鱼腥草素 化学名称为癸酚乙醛 鱼腥草素对金黄色葡萄 球菌等多种病源菌有明显的抑制作用 1 在医药上已广泛用于治疗葡萄球菌等的感染和免疫力低下 等 2 作为医药产品使用的是癸酚乙醛的亚硫酸盐 称为合成鱼腥草素 以癸酚乙醛为前体模型化 合物 合成了一系列活性更高的合成鱼腥草素类似物 3 其中的衍生物之一新鱼腥草素钠 十二酚乙醛 亚硫酸钠 已经投入批量生产 合成鱼腥草素的疏水性较强 在水溶液中不稳定 鱼腥草素及其水解产物又无强的紫外吸收 高压 液相分析检测的灵敏度不高 使 HPLC法测定溶液中合成鱼腥草素含量的报道尚不多见 4 而对于体 内合成鱼腥草素类药物含量的测定尚未见报道 其原因主要是因为脂酚乙醛类药物的临床用量小 体 内浓度不高 很难检测其在动物血液和组织中的微量存在 本研究通过对样品进行碱水解后 用醚提取的预处理方法 建立了 HPLC法定量分析大鼠血液和组 织中微量脂酚乙醛类药物的方法 2 实验部分 2.1 仪器与试剂 510 型高效液相色谱仪 美国 Waters公司 辛酚乙醛亚硫酸钠 HOU-C8 癸酚乙醛亚硫酸钠 HOU-C10 十二酚乙醛亚硫酸钠 HOU-C12 含量 99%以上 均由西南大学药用资源化学研究所提供 甲醇 乙醚 氢氧化钠等试剂均为色谱纯和分析纯 水为二次蒸馏水 SD大鼠 体重 227.8 113.5g 由 重庆医科大学试验动物中卜提供 实验动物合格证号 SCXK 渝 2.2 实验方法 2.2.1 鱼腥草素的水解方法 在 3 支 10 mL试管中分别加入 1 mL6 mg/L合成鱼腥草素 HOU-C10 溶液 1 mL水 或 1 mL0.2 moI/LNaOH 或 1 mL0.2 moI/LHCI 混合均匀后室温放置30 min 然后进 行 HPLC分析 分析条件为 色谱柱为 HypersiIC18 4.6 mm25 mm 流动相为甲醇-水-四丁基氢氧化按 70I30I0.3 V/V