食管癌DNA倍体及增殖活性与病理特征的论文.docVIP

　　食管癌DNA倍体及增殖活性与病理特征的论文 【摘要】 目的 探讨食管癌组织dna含量（di）、合成期细胞比例（spf）、增殖指数（pi）与临床病理特征间的关系。方法 应用流式细胞仪测定98例新鲜食管癌组织细胞的di、spf、pi值，研究其和食管癌临床病理的关系。结果 （1）异倍体率、di、spf、pi等指标在以患者性别、肿瘤大体类型、分化程度、tnm分期等病理特征为分组对象的各组间没有发现差异有统计学意义；（2）食管组织淋巴结阳性组的spf明显大于淋巴结阴性组（p＝0.03）。结论 （1）食管组织一旦癌变后其细胞dna的改变和临床分期等病理指标没有明显关系；（2）食管癌淋巴结转移和食管癌组织合成期细胞比例（spf）有关。 【关键词】 食管癌 流式细胞术 dna倍体 增殖活性 病理 我们采用流式细胞术（fcm）测定98例食管癌新鲜组织细胞dna含量、肿瘤增殖活性，探讨它们和病理学特征之间的关系以及食管癌细胞生物学特点。 1 资料与方法 1.1 病例资料 选取2005年7～9月间在我科手术治疗的食管癌病人98例，其中男68例，女30例，年龄40～79岁，平均58.83岁。.病理组织类型均为鳞状细胞癌；病理大体分型：溃疡型50例，髓质型24例，蕈伞型7例，缩窄型2例，糜烂型1例，斑块型1例，未分型13例。 1.2 方法 1.2.1 制备单细胞悬液 取新鲜组织块（0.5×0.5cm肿瘤组织）放入平皿，pbs冲洗,剪除无用组织。组织块放入试管内，加组织裂解液5ml，然后用眼科剪将组织块剪碎至匀浆状，用吸管吸取组织匀浆，用500目的铜网过滤入试管。离心沉淀（1500r/min，10min）。用pbs洗3次，每次（500～800r/min）8min，除去细胞碎片。以350目的尼龙网过滤，除去凝聚的细胞团块。收集细胞悬液，加入70%冷乙醇固定，置4℃冰箱备用。 1.2.2 dna染色 取出冷乙醇固定好的标本，加入pbs漂洗，离心弃上清，加pi染液，4℃冰箱孵育20min，350目尼龙网过滤后上机分析。 1.2.3 dna含量测定 全部样品采用美国couter 公司epics xl型流式细胞仪测定，测定前用健康人的淋巴细胞对仪器进行校准。multicycle分析软件分析结果。 1.2.4 计算di、spf、pi 以dna指数(di)表示dna含量, di＝肿瘤细胞峰（g0／g1）的均道值／正常细胞峰（g0／g1）的均道值。di在0.90～1.10为二倍体,其余为异倍体。细胞增殖活性以合成期细胞百分比(spf)和增殖指数(pi)表示。spf＝s／（g0／g1＋s＋g2／m）×100％，pi＝（s＋g2／m）／（g0／g1＋s＋g2／m）。 1.3 统计学分析 应用spss12.0统计学软件，组间率的比较采用四格表χ2检验，两组之间均值比较采用t检验,多组之间比较采用单因素方差分析。 2 结果 2.1 dna含量、合成期比例和性别的关系 不同性别组之间食管癌组织细胞dna含量（di）、异倍体率、合成期细胞百分比（spf）、增殖指数（pi）未见显著性差异，见表1。 2.2 dna含量、合成期比例和食管癌大体病理类型的关系 各大体病理类型组之间食管癌组织细胞dna含量（di）、异倍体率、合成期细胞百分比（spf）、增殖指数（pi）未见显著性差异，见表2。 2.3 dna含量、合成期比例和肿瘤分化程度的关系 不同肿瘤分化程度组之间食管癌组织细胞dna含量（di）、异倍体率、合成期细胞百分比（spf）、增殖指数（pi）未见显著性差异，见表3。 2.4 dna含量、合成期比例和淋巴结转移的关系 淋巴结转移阴性组和阳性组之间食管癌组织细胞dna含量（di）、异倍体率、增殖指数（pi）未见显著性差异；而淋巴结转移阳性组的合成期细胞百分比（spf）明显高于淋巴结转移阴性组（p＝0.03），见表4。 2.5 dna含量、合成期比例和tnm分期的关系 tnm分期各组之间食管癌组织细胞dna含量（di）、异倍体率、合成期细胞百分比（spf）、增殖指数（pi）未见显著性差异，见表5。表1 食管癌dna异倍体率、spf、pi和性别的关系表2 食管癌dna异倍体率、spf、pi和肿瘤大体形态的关系*：包括糜烂型1例及斑块型1例表3 食管癌dna异倍体率、spf、pi和肿瘤分化程度的关系 分化程度例数二倍体数异倍体数异倍体率dispfpi高分化2381565.2%1.19±0.230.19±0.150.29±0.16中分4%1.26±0.250.20±0.120.28±0.14低分化2451979.2%1.42±0.370.25±0.140.33±0.15p0.230.070.280.43 4例未注明