丙泊酚 瑞芬太尼对大鼠缺血再灌注损伤肺泡细胞凋亡的影响.docVIP

　　丙泊酚 瑞芬太尼对大鼠缺血再灌注损伤肺泡细胞凋亡的影响 作者：郭晓军 曹定睿* 郭晶宇 杨春艳 张文颉 【摘要】 　　目的：探讨麻醉药丙泊酚(propofol)和瑞芬太尼(remifentanil)对大鼠缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IR)后肺泡细胞凋亡的 影响 。 方法 ：建立大鼠原位热缺血再灌注模型，于结扎前、缺血30 min、再灌注1 h、2 h、4 h给予药物干预，采取肺组织及右房血标本,测定血氧分压，肺组织湿/干重比,并作光镜和透射电镜观察组织细胞形态及超微结构,确定凋亡发生，流式细胞仪测定肺组织中凋亡情况。结果：缺血再灌注组与假手术组比较，血氧分压降低，肺组织湿/干重比增高，肺泡细胞凋亡指数增高，丙泊酚组、瑞芬太尼组与缺血再灌注组比较，血氧分压增高，肺组织湿/干重比降低，肺泡细胞凋亡指数下降。结论：丙泊酚和瑞芬太尼对IR后肺泡细胞凋亡有抑制作用。 【关键词】 丙泊酚 瑞芬太尼 IR 肺泡细胞凋亡 　　Abstract Objective: The experiment ifentanil against the apoptosis of alveolar cells induced by ischemia reperfusion injury.Methods:After the establishment of the ischemia reperfusion in situ models, all rats aceutical intervention.Before the ligation,after 30 min of the ischemia and after 1 h,2 h,4 h repectively of the reperfusion,ples of the right atrium,then detect the partial pressure of blood oxygen,the that the apoptosis happens and detect apoptosis of alveolar cells eter.Results: pared e group，Ischemia-reperfusion group shoia-reperfusion group，propofol treatment group and remifentanil treatment group shoifentanil have suppression to the apoptosis of alveolar cells induced by ischemia reperfusion injury. 　　Key ifentanil；IR；Apoptosis of alveolar cells 　　肺IR可在多种临床情况下发生,是肺移植早期和心肺转流术后肺功能障碍的重要原因，有报道在肝脏、心脏、肾脏、神经系统、视网膜等多种脏器IR损伤过程中均出现细胞凋亡,并对IR损伤的 发展 和该脏器预后具有重大意义。 目前 国内外关于麻醉药物对肺IR中肺泡细胞凋亡的 研究 较少,为此,我们研究了麻醉药物丙泊酚和瑞芬太尼对肺IR中肺泡细胞凋亡过程中的影响。 　　 1 材料和方法 　　1.1 实验动物分组与肺缺血再灌注损伤模型的制备 　　雄性健康in、再灌注1 h、2 h、4 h五个时点取材待检。 　　活结阻断法阻断右肺静脉和右主支气管，使右肺处于萎陷状态，同时将潮气量减少1/3，热缺血1 h后依次开放右肺静脉、右主支气管和右肺动脉，使右肺充分膨胀。 　　1.2 实验方法 　　大鼠麻醉诱导用戊巴比妥钠(30 mg/kg)，用戊巴比妥钠(15 mg/kg)追加维持麻醉。气管插管机械通气，建立静脉通道供输液用。动物缺血30 min后丙泊酚组给予5 mg/(kg·h)。瑞芬太尼组给予0.5 μg/(kg·min)。实验结束时即采左心房血测定血氧分压,测定肺组织湿/干重比,并结合光镜观察评价肺损伤。通过电镜观察细胞形态及超微结构,从形态学角度确定凋亡发生。采用流式细胞仪对右肺中叶凋亡细胞进行定量检测,按细胞凋亡检测试剂盒(AnnexinV杭州联科公司)说明书操作，取右肺中叶组织,置于无菌培养皿中,剪碎,置于过滤离心管(滤过直径35 μm ,Becton Dickinson ,美国) 中,4 ℃,1 000转 离心5 min ,去上清后加入PBS（磷酸盐缓冲液） ,混匀成细胞悬液。左、右肺组织细胞凋亡率检测使用Annexin V/ PI 试剂盒,将细胞悬液计数调整成1×106/mL 的浓度,用Binding buffer 液冲洗,4 ℃, 1 000