氯化两面针碱的体内抑瘤作用及机制.docVIP

　　氯化两面针碱的体内抑瘤作用及机制 【摘要】 　　目的研究氯化两面针碱对S180荷瘤小鼠的的抗肿瘤作用及机制。方法以荷瘤小鼠实体瘤瘤重为实验指标评价氯化两面针碱对S180移植性肉瘤的抑制作用，免疫组织化学方法检测肿瘤组织中的p53、Bcl-2和Bax蛋白。结果氯化两面针碱 2.5，5和10 mg·kg-1剂量对S180肉瘤生长的抑制率分别为1.95%，27.3%和42.9%，p53、bcl-2蛋白的表达率明显低于对照组，bax蛋白表达率高于对照组。结论氯化两面针碱对小鼠S180肉瘤有抑制作用，其机制可能与影响癌基因的表达有关。 【关键词】 两面针 氯化两面针碱 抗肿瘤 中药 　　Abstract：ObjectiveTo investigate the anti-tumor effect of Nitidine chloride in vivo on Sara180（Sl80）mice and its mechanism. MethodsThe antitumor effect of Nitidine chloride or munohistochemistry. ResultsNitidine chloride significantly inhibited the groor, the inhibitory rate at the dose of 2.5，5，10mg · kg- 1 or effect in vivo, and its influence on oncogene may be one of its anti-tumor mechanism. 　　Key nitidum(Roxb.)DC; Nitidine chloride; Anti-tumor; Traditional Chinese medicine 　　氯化两面针碱（Nitidine Chloride）是从广西特有药用植物两面针Zanthoxylum nitidum (Roxb)DC的根中分离到的具有抗肿瘤活性的生物碱，据 　　2.4 统计学处理 　　所有数据用±s表示，用SPSS 10.0 行单因素方差分析。 　　 3 结果 　　3.1 氯化两面针碱对小鼠移植瘤生长的抑制作用 　　实验前期各组运动活动正常，精神状态良好，食欲正常。接种后第3天，对照组和药物 治疗 组荷瘤鼠腋下移植瘤肉眼可见如黄豆大小。至第7天开始对照组小鼠瘤体生长迅速，小鼠活动减少。实验后期，对照组出现运动少、毛发干燥、无光泽，消瘦明显。药物治疗各组运动精神状态较前为差，毛色白、有光泽，消瘦不明显，饮食正常，瘤体生长较慢。至实验结束时各组小鼠均无死亡。由表1可见氯化两面针碱对小鼠移植性肉瘤S180的生长有较强的抑制作用，氯化两面针碱中、高剂量组的肿瘤重量明显降低，呈现很好的量效关系。与对照组相比，差异有统计学意义。其中高剂量组的肿瘤抑制率接近50%，与CTX相近，抑瘤效果较好。表1 氯化两面针碱对小鼠S180肉瘤的抑制作用（略） 　　3.2 瘤组织病理形态学观察对照组瘤细胞生长旺盛，细胞较密集或呈大片状，核分裂数多，浸润较深，部分至脂肪、肌层，血管较丰富，坏死范围较小。氯化两面针碱各组及阳性对照组上述各指标程度较轻，有不同程度的坏死，间质显著增多，且有大量淋巴细胞、巨噬细胞浸润。见图1～2。 　　3.3 免疫组织化学法检测凋亡相关蛋白表达 S180小鼠肉瘤组织中氯化两面针碱各组p53表达与对照组比较明显下降；氯化两面针碱组Bcl-2表达较对照组弱，而对照组中阳性表达较强，说明氯化两面针碱各组p53，Bcl-2在S180肉瘤组织中的表达有下调的趋势；氯化两面针碱各组Bax的阳性表达与对照组比较明显增强，说明氯化两面针碱可以上调S180肉瘤组织中Bax的蛋白表达。表2 免疫组织化学染色综合评分（略） 　　 4 讨论 　　本实验观察不同浓度的氯化两面针碱对小鼠S180肉瘤的抑制作用，氯化两面针碱中、高剂量组的肿瘤重量明显降低，其中高剂量组的肿瘤抑制率接近50%，与CTX相近。表明氯化两面针碱在动物体内有较强的抑瘤作用。 　　p53基因是迄今发现与人类肿瘤相关性最高的基因，也是目前肿瘤疾病中最常发生变化的基因。研究表明，p53基因在细胞周期调控、DNA修复、合成、细胞分化、凋亡等环节起着非常重要的作用［4，5］。p53分为野生型和突变型两种。正常细胞中含野生型p53 基因及其p53 蛋白，在DNA 损伤修复中有着重要的作用，是DNA 损伤后进行应答和修复的分子物质，对细胞分裂和增生起负调节作用，能维持细胞的的正常生长、抑制恶性增殖、诱导细胞凋亡。突变型p53蛋白抑癌功能丧失，通过正信号调节作用，促进细胞进入增殖周期，最终使细胞生长和分化调节失控，导致细胞持续分裂