螺旋藻激酶提取物对血栓形成的影响.docVIP

　　螺旋藻激酶提取物对血栓形成的影响 作者：陈高斯 李小花 庞辉 贾晓栋 秦小茹 罗冬 覃颖脱 李运福 【摘要】 目的 探索螺旋藻激酶(SPK)提取物对血栓形成的影响。方法 体外采用试管法测定家兔全血凝固时间；体内采用结扎老年大鼠下腔静脉法复制静脉血栓模型，称取血栓重量，采用毛细管法、剪尾法测定老年小鼠凝血时间(CT)和出血时间(BT)的变化，观察SPK提取物对静脉血栓形成的影响。结果 SPK使体外试管法CT显著延长，使血栓形成实验的静脉血栓重量减轻，同时SPK也可以使老年小鼠的CT和BT显著延长，且各结果均具有明显的剂量效应依赖关系。结论 SPK提取物具有明显的抗凝作用。 【关键词】 螺旋藻激酶；抗凝血；血栓形成 【Abstract】Objective To observe the effect of Spirulina kinase (SPK) extract on thrombus formation. Methods The clotting time of rabbit odel in vitro. The venous thrombus models buses e (CT) easured by capillary method and the bleeding time (BT) easured by cutting the rats tail. Results The SPK extract could significantly extend the time of CT, alleviate the bus, prolong the time of BT. The effects had significant doesdependence. Conclusions The SPK extract has obvious effects of anticoagulation. 【Key bus formation 　　血栓性疾病是临床的常见病、多发病，由血栓引起的心脑血管疾病，如急性心肌梗死、脑卒中等严重地危害人们的健康，抑制血栓的形成对防治心脑血管疾病具有重要意义。从膳食成分中寻找和开发抗血栓和溶血栓的物质具有广泛的实用价值。螺旋藻(SP)是一种蓝藻门颤藻科水生植物，广泛分布于 中国 广西、福建、云南、海南等省区，实验证明它有抗氧化、抗衰老、抗损伤、抗辐射、降血脂、促进蛋白合成、提高免疫等功能，它现在已经开发出具有多种功效的天然绿色保健品〔1〕。而作者首次把SP经过发酵处理后得到一种蛋白激酶，并将其命名为螺旋藻激酶(SPK)。经初步观察它具有抗凝溶栓作用，为此本研究主要使用SPK提取液从体内、体外两个方面来观察SPK对血栓形成的影响，现报道如下。 　　 1 材料与方法 　　1.1 材料 　　SPK提取物的制备：SPK粉由北海市康福保健食品有限公司提供，经广西测试中心检测其蛋白激酶含量为6 000 FU(活力单位)/g,按照10 g粉剂溶于100 ml生理盐水的比例混匀，于-4℃冰箱放置过夜后，以3 000 r/min离心10 min，弃去沉淀，上清液即为SPK溶液。SPK干粉剂混悬液的制备：首先 参考 　　1.4.3 小鼠体内凝血时间和出血时间的测定 　　凝血时间(CT)的测定采用毛细管法，出血时间(BT)测定采用剪尾法〔3〕。CT的测定：昆明种小鼠24只，随机分为SPK高剂量、低剂量及生理盐水对照组3组，每组8只，高剂量组SPK混悬液60 fU/g，0.4 ml/10 g，低剂量组SPK混悬液30 fU/g，0.4 ml/10 g，生理盐水对照组为0.4 ml/10 g，灌胃给药5 d，最后一次灌胃1 h后，于末次灌胃给药后30 min将毛细管(内径1 mm，长10 cm)插人小鼠眼内眦球后静脉丛，自血液流入开始计时，注满后取出平放于桌面上，每隔30 s折断毛细管两端约0.5 cm，并缓慢向左右拉开，直至凝血丝出现为止，所经历的时间即为凝血时间。BT测定：动物分组与给药与凝血时间测定相同，各组小鼠连续灌胃5 d后，于末次给药30 min后，将小鼠固定，以毫米尺测量距离鼠尾尖5 mm处并标记之，然后分别用利剪于标记处横断，待血液自行溢出开始计时，每隔30 s用滤纸吸取血滴1次，直至血液自行停止(滤纸吸时无血)为止，即为出血时间〔3〕。 　　1.5 统计学处理 　　所测数据采用SPSS13.0软件，数据以x±s表示，组间差别显著性用t检验。 　 　2 结果 　　2.1 SPK的体外抗凝作用 　　SPK低剂量组凝血时间(19.93±3.62)min明显延长(P＜0.01)，较生理盐水组(9.35±2.67)min提高113.2%，SPK高剂量组观察3 h均未凝固。