冰冻机采血小板的制备及应用.docVIP

　　冰冻机采血小板的制备及应用 作者：孙辙 胡运华 黄锦 赵予 【关键词】 采血小板 　　随着输血医学的不断 发展 ，临床输用血小板需求量日趋增加。而 目前 国内外通用的血小板保存 方法 及供应数量、供给及时性远不能满足临床需要。常规保存方法（22℃，5d）极大的限制了血小板的临床 应用 。深低温保存可能是维持生物细胞、组织活性最理想的方法之一，也是许多 研究 人员目前致力的重要方向。宜昌市中心血站为满足临床危重病人的抢救需要，于2003年开展冰冻血小板的制备，笔者现对冰冻血小板的制备过程做一介绍和 总结 。 　　1 材料与方法 　　1.1 采集对象 血小板计数gt;150×10 9 /L，体检合格，1周内未服任何 影响 血小板功能的药物，来自本市的自愿献血者78名。均为男性，年龄20～48岁，平均34岁。 　　1.2 材料 CS―3000PLUS血细胞分离机、4R2210单采管道、二甲基亚砜（10ml装）、冰冻保护袋、塑料灌装针、注射器。 　　1.3 方法 　　1.3.1 采集方法 选择程序，分离夹为TNX-6，产品夹为A-35，采用16号针头双侧肘正中静脉连续流动式采血。采集后的血小板作外观检查，不可有血小板聚集和纤维蛋白析出。 　　1.3.2 冰冻方法 在无菌室操作台制备，单采血小板袋与专用冰冻保护袋相连，将血小板压入冰冻保护袋，连接塑料注入针，针尖部处于袋内中央，用注射器抽取二甲基亚砜，以1ml/min的速度缓慢注入袋内，边注边摇动冰冻保护袋，使之水平旋转，防止注入过程中产热。二甲基亚砜在产品中的终极浓度为5%。完毕后热合封口立即放入-80℃冰箱。 　　1.3.3 解冻复融方法 将冰冻的血小板取出后，置入42℃恒温水浴箱中，轻轻摇动冰冻袋，以防损伤，直至融化。融化后放置时间不宜过长，应立即输注给病人。 　　1.4 检测方法 分别在机采血小板制备及加入保护剂后留样，加入了保护剂的样本与产品同时冰冻，以备复融后检测。用瑞士产ABX-MICROS血细胞计数仪检测。 　　1.5 计算 公式 　　细胞含量=细胞计数×容量/1000 　　血小板采集效率=产品的血小板计数×容量/（处理全血量-ACD用量）×供者的血小板计数 　　2 结果　　CS-3000PLUS血细胞分离机采集，血小板78例，采前每位供者都取手指血进行细胞计数，见表1。解冻后样本血小板计数，见表2。 　　表1 采前供者血细胞计数及机采血小板产品的细胞计数和含量（略） 　　表2 复融前后产品血小板计数（略） 　　3 讨论 　　低温保存血小板的目的简单地说就是要保存新鲜血小板的生理功能，其冻存效果检测也是紧紧围绕这个中心进行。二甲基亚砜是细胞内深低温保护剂，分子量小，易透过细胞膜进入细胞内，起到对细胞膜的保护作用。对血小板保存效果好，对人体没有副作用及制作方便，输入时不用洗涤。有一定的抑菌和抗血小板凝集作用可明显防止微循环堵塞。低温保存血小板与新鲜血小板相比功能恢复情况，国内外