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改良明胶酶谱测定明胶酶活性
·282 · 2003 3 28 3 Med J Chin PLA Vol 28 No 3 Mar 2003
· ·
①
710032 骞爱荣 商 澎 陈志南②
2cm , (1~2h);③
;;;
, 2.5% Triton X-100 , 2
R965.2
(45min/), , 37℃ 12~ 16h。④
(MMPs) 4h;1~2h, ,
。、、 , 。
(MT-MMP)5。MMPs 1.6
[1]
28 。MMP 72k 92k , MMP-2MMP-9。
, 、、 。
、, A B(MMP-2, 9) 、, ;。
[2]
。
2
, (gelatin zymog-
raphy), , - 2.1 1
S S。, 、。, 、。 100μl
, MMPs , ,
。, , MMP-2。
, 、、。MMPs 。
, , 。
1
1.1 ( Bio-Rad
), (), 96 (Nunc
), , CO (Heraeus ), ,
2
。,Triton X-100()。
1.2
1.2mm, 13.3mm, 5 。 1
1.3 1%;2×(5%S S, 2% 2.2 2 ,
, 0.2%, 50mmol/L Tris-HCl, pH 6.8); 。MMPs 5、10、15h
25mmol/L Tris, 250mmol/L ,pH 8.3, 0.1%S S; 。1、3、5 , 2、4、6
:①30%;②1.0mol/L Tris-HCl 。
(pH6.8);③1.5mol/L Tris-HCl (pH8.8);④10%S S;⑤10% , , 。
;⑥10%TEME ;2.5% Triton X-100 ;
50mmol/L Tris, 10mmol/L CaCl, 200mmol/L NaCl, 1μmol/L ZnCl
2 2
(pH 7.5);0.1% R-250;∶∶
=45∶45∶10.
1.4 ①(Fb)(HHCC)
5
, 0.25%, 10/96
, 24h;②, , PBS2, 300μl
, 24h;③,
(200g ),4℃。
2 (5、10、15h)
1.5 ①8%
5%, 0.1%,
S S-。② 骞爱荣, 在读博士生。主要从事肿瘤细胞生物学和肿瘤药物学。已发
, (80~ 100μl), 1/2 表论文5 篇, 与申请专利2 项, 其中1项是国际PCT 专利。
, 150μl, , , 8V/cm ① ((863)
(2001AA215061);②
, 10V/cm,
2003 3 28 3 Med J Chin PLA Vol 28 No 3
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