超声波复合酶法提取桦褐孔菌多糖的工艺研究.pdfVIP

2013年3月 超声波复合酶法提取桦褐孔菌多糖的工艺研究 l5l 超声波复合酶法提取桦褐孔菌多糖的工艺研究 黎明晴 邓愍民 李进进 宋 伟 (江西国药有限责任公司，江西 南昌 330052) 摘 要 ：目的：研究超声波复合酶法用于提取桦褐孔菌多糖的效果。方法：采用超声 波复合酶法对桦褐孔菌进行处理，以桦褐孔菌提取物中多糖得率和多糖含量为综合评价 指标，考察了超声波复合酶法中主要因素对桦褐孔菌多糖提取效果的影响，并通过正交试 验确定出最佳工艺条件。结果：超声波复合酶法提取桦褐孑L菌多糖最佳工艺条件：超声时 间30min，超声波功率400W，酶解时问40min，酶解温度40~C。结论：超声波复合酶法双重 处理可显著提高桦褐孔菌多糖的提取效果。 关键词 ：桦褐孔菌 多糖 超声波 复合酶 桦褐孑L菌 (Inonotusoblquus)，又名白桦茸 、桦癌 菌采 自吉林长白山地区，经江西省中医药研究院鉴定 褐孔菌，属担子菌亚门，层菌纲，无褶菌 目，锈革菌科， 为锈革菌科真菌桦褐孔菌(Inonotusoblquus)。 褐卧孔菌属 j，主要分布于俄罗斯北部、北欧、中国 2 方法与结果 黑龙江和吉林长白山、日本北海道等北纬4o。一5O。地 2．1 多糖标准曲线的制备 区 J，外表面呈黑色，像碳一般的硬度，内部呈黄褐色 采用苯酚一硫酸比色法…测定多糖含量。分别精 或茶褐色。从 16世纪开始 ，俄罗斯、波兰、芬兰等国家 确吸取0．Img／mL葡萄糖标准溶液0．1，0．2，0．3，0．4， 的民间就开始食用桦褐孔菌，民间广泛用于防治消化 0．5，0．6，0．7，0．8，0．9mL，分别用去离子水补至 1． 道疾病 、肿瘤 (胃癌 、肠癌及肝癌等)心血管疾病和糖尿 OmL，然后 ，依次加入 1．0mL的5％苯酚和5．OmL浓硫 病等。桦褐孔菌多糖具有免疫增强功能，在防衰老、抗 酸摇匀，以 1．0mL去离子水做参 比，在室温下放置 肿瘤和抗炎等方面都发挥重要作用 J。 30min后 ，测定葡萄糖标准溶液在485nm下的吸光度， 热水浸提是提取桦褐孔菌多糖最常见的方法，但 以吸光度对葡萄糖质量浓度进行线性回归，得到标准 较高的温度容易破桦褐孔菌多糖的生物活性。水提法 曲线工作方程：A=8．9162X一0．0058×10，r：0．9992。 时间长，耗能大 ，近年来 ，人们采用超声波技术提取多 2．2 样品多糖含量测定 糖取得了很好的效果 j。酶法是一种温和的方法，不 分别称取样品多糖 10mg，用去离子水溶解 ，于 会破坏多糖的结构，是获得生物活性多糖的高效方法， 100mL量瓶中定容至刻度，摇匀，精密吸取2mL于具塞 但采用超声波协同复合酶提取桦褐孔菌多糖的报道很 试管中，加入 1．0mL的5％苯酚和5．0mL浓硫酸摇匀。 少，为验证此方法的提取效果 ，本试验采用正交试验设 以1．0mL去离子水做参比，在室温下放置30min后 ，测 计法优化超声波协同复合酶提取桦褐孔菌多糖的最佳 定葡萄标准溶液在485nm下的吸光度，代人回归方程 条件。为桦褐孔菌多糖的研究及应用提供实验依据。 计算各样品多糖含量。 l 仪器与试剂 2．3 多糖的提取 Sartofius(BS224S型)电子称(北京赛多利斯仪器 将桦褐孔菌用粉碎机粉碎，过40目筛 ，用天平称 系统有限公司)；DF一20型流水式中药粉碎机 (无锡中 取 100．Og，加适量水湿润 1h，第一次加 1O倍去离子水， 银机械制造有限公司)；V1700紫外 一可见分光光度计 第二次加8倍去离子水，超声