猪伪狂犬病病毒野毒抗体胶体金免疫层析试纸条的初步应用.pdfVIP

Chínese Joumal of Velerinary Medícíne 中国必医杂志 2016年{ 却~ 52号声)骂~9 期 35 猪伪狂犬病病毒野毒抗体肢体金兔疲 层析试纸条的初步应用 雷有玲\张文2 ( 1.青海省海北州门源县北山乡兽庆站.青海门源 8 1 03∞: 2. 青海畜牧件厌职业技术学院 . 青海两宁 8121∞) 摘要:为.ill立一种简单、快庄、敏感、特异的猪伪狂犬病州也野毒抗体JÚL 的学检测方法， 本研究和l 川胶体金标ìèSPA 蛋白作为金标垫，以重组gE 蛋白和l 猫r 1gC 分别作为检测线和lJ.iJì控钱 ， 组装检测站·伪狂犬病病毒gE抗体的肢体金免疫层 析试纸条。 该试纸条肉眼于15 min 内 UII 可判定结果，检测PCV-2、 PRRSV 、 PEDV 、 CSFV 、 PPV 、 PRV 疫苗璋的阳性血泊均 为阴性，检测 PRV 野毒阳性血清的灵敏度达 1 : 1280 ， 与 IDEXX gE-ELlSA 抗体检测试剂盒的符合率为95.3 1 %，室温条 件下可稳定保存6 个月以上。 本研究研制的PRV 野毒抗体胶体金免疫层析试纸条操作简单、检测快淫、敏感性高、特异 性强，可用于PRV 野毒感染的快速诊断，特别适合于现场检测。 关键词:猪伪狂犬病病毒 ;野ì.(] 抗体; gE蛋白 ;胶体金免疫层析; 试纸条 中图分33 号 : SR58. 28 义，ij;标志码:八 义幸编号: 0529-ω05(2016 )09- 0035-03 猪伪狂犬病(pseudorabies , PR )是由猪伪狂犬 于此，本研究在已成功表达PRV gE 蛋白的基础 病病毒( PRV) 引起的多种家畜和野生动物易感的 上，将其纯化后作为检测线，同时以胶体金标记 一种急性、败血性传染病，猪是PRV 的主要宿主 SPA 蛋白作为金标垫，以猪IgG 作为质控线，组装 和带毒者，可引起公猪不育，母猪流产、产死胎和 了具有自主知识产权的检测猪伪狂犬病毒gE 抗 木乃伊胎，仔猪神经症状、腹泻，新生仔猪病死率 体的胶体金免疫层析试纸条，旨在为我国PRV 野 病毒感染的快速诊断提供一种操作简单、敏感、 可高达1∞%，成年猪常呈隐性感染、 生长性能减 慢、且终身带毒并排毒，给我国养猪业造成了巨 特异的血清学诊断方法。 大的经济损失。 疫苗免疫接种是预防控制PR 的 1 材料与方法 重要手段，目前国内外普遍采用PRV gE 基因缺 1.1重组质粒、 菌株与血清 表达PRV gE蛋白的 失疫苗及配套的gE 抗体鉴别诊断技术逐步对 重组质粒pET30a-gE、表达菌株B121 ( 0E3 )感受态 PRV野毒实行净化，由于gE基因缺失疫苗的广泛 细胞，均由青海畜牧兽医职业技术学院兽医实验 应用，我国有效控制了PR 的发生与流行，但近几 室制备并保存;猪圆环病毒2 型(PCV-2) 、猪繁殖 年来，国内养猪密集地区陆续出现PRV 野毒感染 与呼吸综合征病毒( PRRSV) 、 猪流行性腹泻病毒 的病例，PR 发病率明显上升川，故急需加强对 ( PEOV ) 、猪瘟病毒(CSFV) 、猪细小病病毒( pPV) 、 PRV 野毒的监测。 目前，PCR 方法、 荧光定量PCR PRV疫苗毒阳性血清、PRV 野毒阳性血清、PRV 阴 方法、ELISA 方法均已