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荧光发光测定AGPase活力方法初步建立及应用.pdf
飞接?
西北槌物学报.2009.29(9).1920…1923
Acta Bot. Boreal. -Occident. Sin.
文章编号，1000-4025(2009)09-1920-04
荧光发光测定 AGPase 活力
方法初步建立及应用
姚新炎1·2 ，黄 婷2 ，马一娟2 ，王亚照2 ，贾慧、萍2 ，郭蔼光l 僻
(1西北农林科技大学生命科学学院，陕西杨陵 712100 ， 2 宁夏大学教育部两部特色生物资源保护及利用3重点实验嚎，银川
75002 1)
摘 要:腺背工磷般葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase) 插力传统上采用32p 间位露营标记反应底物来测定，何肉测定条件
的限制而极大地影响了其应用。该研究依据焚yt. 素酶催化荧光京生成发光氧化荧光素的原珉，在优化基本反Tlìl 体
系、确立反成体系 A丁P 浓度和荧光强度线性关系等基础仁，初步建证了以荧光发光反应测定 AGPase 活力的新方
法，并运用新方法测定了含有不[I:lj glgC 基因拷贝数衡株的 AGPase 活力。测定结果战示，不间商株 AGPase 7活力
随 glgC 拷Þl 数不间存在显著兼异，且具变化趋势与理论预期一致，即新方法可用于 AGPase 插力的体外测定，且
具布更加安全、灵敏、简便和成本低的特点。
关键调:AGPase; 酶活力;测定:荧光反应z 菌株
q:t图分类号， Q503 文献栋识码:A
Initial Establishment and Application of AGPase
Activity Assay with Fluorescence
铃
J 2 2 2 2 2 J
YAO Xin叫ling • ， HUANG 丁ing ， MA Yi-jing ,WANG Ya-xu ,JIA Hui明ping ,GUO Ai-guang
(1 Life Science School , Northwest AF University , Yangling 712100.China õ 2 Laboratory of PASBR , Ningxia University. Yin-
chuan 750021.China)
Abstract: ADP-glucose pyrophosphorylase (AGPase) catalyzes the reaction for formation of ADP-glucose ,
which is the substrate of starch and glycogen biosynthesis in plant and in bacteria. The reaction is the key
step in starch and glycogen bíosynthesis. Tradítionally. AGPase activity is assayed through quantífying
changes of 32 P radio activíty before or after the reactíon. The assay was limited by poor availability of ex-
perimental condítíon.
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