猪瘟实验室诊断技术.pdfVIP

畜牧与饲料科学 Animal Husbandry and Feed Science 2010 ，31 （3 ）:186 猪瘟实验室诊断技术 郑允志 （江苏省铜山县畜牧兽医站，江苏 铜山 221000 ） 摘要：猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种急性、热性、高度接触性传染病，以发病急、高热稽留和细小血管壁变性引起广泛性 出血、梗塞和坏死变化为特征。 从猪瘟病料的采集和处理、病毒分离、猪体回归感染试验、家兔交叉免疫试验、血清学诊 断、分子生物学诊断等方面进行了介绍，以期为猪瘟实验室诊断提供参考。 关键词：猪瘟；实验室诊断 中图分类号： 文献标识码： 文章顺序编号： （ ） S852.651 A 1672-5190 2010 03-0186-01 表 被检样品中有或无猪瘟病毒的判定 1 病料的采集和处理 1 应采集的猪瘟病理组织为扁桃体、脾、肾和回肠末段。 注射被检样品 注射猪瘟兔化疫苗 判定被检样品 后的发热反应 毒后的发热反应 中含有的病毒 扁桃体是猪瘟病毒感染后最先呈现病毒抗原阳性的病料， 无 猪瘟病毒 因而是急性病例的首选病料。相反，回肠末段是慢性病例的 无 有 无 首选病料。病料应从多个病猪采集。采集到的病料不加防腐 无 猪瘟兔化疫苗毒 剂，置低温（冰盒）尽快送到实验室。实验室通常用直接免疫 有 有 可能含有猪瘟或猪瘟兔 化疫苗毒以外的致热原 荧光法和接种细胞培养分离病毒进行病原学诊断。 用于直 接免疫荧光法的病料要求采集新鲜的病料， 用于病毒分离 的冷冻切片。 经丙酮固定后，滴加猪瘟荧光抗体 （商品），置 湿盒内 后取出， 用磷酸盐缓冲液漂洗 次，晾 的病料要求尽量无菌采集。 37 ℃ 45 min 5 干，用缓冲甘油（ 值 ）封片，荧光显微镜检查。 细胞浆 2 病毒分离 pH 9.5 用猪肾和睾丸的原代、次代或传代细胞均可。 中呈现黄绿色荧光，指示有猪瘟病毒抗原存在，如反差不明 显，可用 伊文思蓝复染（复染后脱色不要过度）。 病料经研磨、离心、除菌滤过后接种细胞培养，如果细 1％ 胞不出现病变， 通常用荧光抗体法可测出细胞培养中盖玻 5.2 中和试验 在被检病料制剂接种细胞培养前， 分别与 片上细胞浆内的病毒抗原。