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猪白细胞介素_6的原核表达及其生物学活性研究.pdf
· · 生物技术 中国畜牧兽医 年第 卷第 期
２０１１ ３８ １１
１０２
猪白细胞介素 的原核表达及其生物学活性研究
－６
１ ２ ２ ２ ２ ２
， ， ， ， ，
马文涛 闫若潜 吴志明 刘光辉 盛敏 谢彩华
（ ， ； ， ）
河南农业大学牧医工程学院 河南郑州 河南省动物疫病预防控制中心 河南郑州
１． ４５０００２ ２． ４５０００８
： （ ） 、 （
摘要 本研究采用 ＲＴ ＰＣＲ方法自细菌脂多糖 ＬＰＳ 刺激的猪脾脏细胞总 ＲＮＡ 中扩增 克隆猪白介素 ６ ｏｒｃｉｎｅｉｎｔｅｒ
－ － ｐ －
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ｌｅｕｋｉｎ６ＰｏＩＬ６成熟肽基因 并亚克隆入 ＱＥ３０载体进行原核表达 对表达的重组融合猪白介素 ６ ｒＰｏＩＬ６ 蛋白通过尿素
－ － ｐ － －
、 、 、 ，
变性 低浓度复性液复性 透析等步骤进行复性 纯化 采用 试剂盒检测 蛋白与抗 单抗发
ＰＢＳ ＰｏＩＬ６ＥＬＩＳＡ ｒＰｏＩＬ６ ＰｏＩＬ６
－ － －
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生特异性免疫反应的活性 采用 法检测 蛋白促猪脾脏细胞的增殖活性 结果表明 成功克隆了全长 的
ＭＴＳ ｒＰｏＩＬ６ ５５５ｂ
－ ｐ
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成熟肽基因 表达的 蛋白分子质量大小约 纯化后的 蛋白纯度在 以上 可和抗 单抗
ＰｏＩＬ６
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