无细胞蛋白表达体系在生物制药工程中的应用.pdf

中田医药辱牛学2017年1月第7卷第1期 ·生物医学 · 无细胞蛋白表达体系在生物制药工程中的应用 谢典佑 中国药科大学生命科学与技术学院，江苏南京211199 【摘要 】作为体外合成蛋白表达手段的一种，无细胞蛋白表达体系有着蛋白合成高效快速、反应操纵简便等 方面的优点，在基础生物学领域的研究中有着广泛的应用价值。无细胞蛋白表达体系 目前已成功应用于重 一一一一一～一一一～～．一一一一一一一一一一～一．一一一～一．一一一一一一．一一～～一一．一一一一一～一一一一～～一一～～～一一一一一～ 组蛋白药物的生产。高通量药物筛选等领域，为解决生物制药领域中的难题提供了新的解决思路。同时， 经过研究人员的不断努力，对其在生物制药工程中的应用也取得了新的研究进展，显示出重要的应用潜能。 本文基于对无细胞蛋白表达体系的阐述和分析，对其在生物制药工程中的应用做出了相关的探讨和研究， 以期能为生物制药领域的发展提供一定的技术支撑和借鉴。 【关键词 】生物：制药工程；无细胞蛋 白；表达体系；应用 【中图分类号 】Q78 [文献标识码 】A 【文章编号]2095—0616(2017)01—45—04 Applicati0n ofn0n—cellular protein expressi0n system in biologicalpharmaceuticalengineering X／E Dianyou 删～一一一～一～一～一一一一一一一一一一 随着生物科学技术的发展，人们对蛋 白质组学 统在生物制药工程中的有效应用问题，将对更好地 相关的前沿领域的研究越来越关注，无细胞蛋 白表 实现该系统在制药科学领域应用潜力的发挥有着 达体系(cell—freeproteinsynthesis，CFPS)也因此备 重要的理论和现实意义。 受重视。尤其是近些年来，无细胞蛋白表达体系的 1 无细胞蛋白表达体系概述 研究已逐渐从原核深入到真核的反应体系 ，成本不 作为一种生物学技术，传统的蛋 白表达是基于 断降低。较之于传统的体内表达体系，无细胞蛋白 细胞体内，对动植物细胞以及细菌等外源基因的表 表达体系基于细胞提取物，有着不受细胞的生理限 达。而无细胞蛋 白合成系统是一种全新的蛋 白合 制以及胞 内蛋 白酶的降解、可以在较短的时间内进 成方式，实现 了以外源 DNA或mRNA为模板，利 行大量的毒性蛋白表达、无需繁杂的下游处理以及 用细胞抽取物中的蛋白因子、相关的酶系等，通过 产物的活性增加等诸多方面的应用优势 ”【。同时， 在体系内加入ATP、GTP以及氨基酸、能量再生物 其在生物制药中也逐渐体现出了毒性蛋白、复杂蛋 质等来实现蛋白表达的体外系统 [21(如图 1所示)。 白以及膜蛋 白表达等方面的优势。但由于天然蛋 自1982年世界上第一个重组蛋白药物胰岛素问世 白水溶性差、半衰期短等因素的影响，如何实现重 以来 ，重组蛋 白药物 由于来源广泛，且有着较高的 组蛋白的稳定表达，发挥无细胞蛋白表达体系在医 安全性在短短几十年时间就实现了在生物制药领 疗方面的应用潜力，就成为生物制药领域的重要研 域的飞速发展 ，在全球药物市场上越来越 占据着举 究课题。因此，本文讨论和研究无细胞蛋 白表达系 足轻重的地位。表达重组蛋 白药物最常用的系统 中国药科大学2014级生物制药卓越工程师班在读 包括大肠杆菌、酿酒酵母以及中国的仓鼠卵巢细 CHINAMEDICINEAND PHARMACY Vo1．7 No．1 January 2017 · 生物医学 ·