实验一蛋白质含量的测定-凯氏定氮法1资料.pptVIP

实验一 蛋白质含量的测定―凯氏定氮法 一 目的： 学习凯氏定氮法测定蛋白质含量的实验原理 掌握蒸馏、滴定操作技术 二、原理：蛋白质含N量约为16％，测出含氮量推知蛋白含量。 消化：有机物与浓硫酸供热，使有机氮全部转化为无机氮- --硫酸铵。添加硫酸铜和硫酸钾的混合物，前者为催化剂，后者提高硫酸沸点。 CH2NH2COOH+3H2SO4 2CO2+3SO2十4H2O十NH3 2NH3+H2SO4 (NH4)2SO4 蒸馏吸收：浓碱使消化液中的硫酸铵分解，游离出氨，借水蒸汽将产生的氨蒸馏到硼酸溶液中，硼酸吸氨后使溶液中的氢离子浓度降低，指示剂变色 (NH4)2SO4 + 2NaOH → Na2SO4 + 2H2O + 2NH3↑ NH3 + HBO2→ NH4BO2 （H3BO3 → HBO2 + H2O） 滴定：标准HCl滴定，直至恢复溶液中原来的氢离子浓度为止，根据所用标准酸的摩尔数(相当于待测物中氨的摩尔数)，计算出样品中的总氮量。 NH4BO2 + HCl → HBO2+NH4Cl 三、试剂与器材 1、消化液：H2O2：H2S04 ：H2O=3：2：1 2、粉末硫酸钾―硫酸铜混合物  K2S04与CuS04.5H20以 3：1