HPLC法测定感冒清热颗粒中葛根素的含量_0.docVIP

HPLC法测定感冒清热颗粒中葛根素的含量 【摘要】 目的 应用 HPLC法对感冒清热颗粒中葛根素进行含量测定。 方法 选用Hypersil C18色谱柱（5μm，100mm×4.6mm），甲醇-水（22：78）为流动相，检测波长为250nm，流速为1.0ml/min。结果 线性范围为0.1384～1.384μg（r=0.9997），平均回收率为99.84%，RSD=1.65%。结论 本法简便、灵敏、准确。 【关键词】 HPLC 感冒清热颗粒 葛根素 【Abstract】 Objective To determine content of puerarin in Ganmaoqingre granule by HPLC.Methods Hypersil C18（5μm,100×4.6mm）was used,and the Meoh-eater（22:78）was served as mobile phase,and it′s flowrate was 1.0ml/min,wave length of determining was 250nm.Results The linearity range was within 0.1384～1.384μg（r=0.9997）.The average recovery was 99.84%,RSD=1.65%.Conclusion This method is simple,sensitive,and accurative. 【Key words】 HPLC;Ganmaoqingre Granule;Puerarin 感冒清热颗粒由荆芥穗、苦地丁、葛根等11味中药制成，具有疏风散寒、解表清热的功效，用于风寒感冒，头痛发热，恶寒身痛，鼻流清涕，咳嗽咽干。为更好地控制产品质量，本试验选用HPLC法对其臣药葛根的有效成分葛根素进行含量测定，结果满意。 　　1 仪器与试药 Agilent 1100高效液相色谱仪：四元梯度泵，二极管阵列检测器，Agilent 1100工作站；TP-150型超声波清洗器，AG135 电子 分析 天平；葛根素对照品（110752-200108，供含测用）由 中国 药品生物制品检定所提供；感冒清热颗粒由湘中制药有限公司提供；甲醇为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。 2 实验方法与结果 2.1 色谱条件 Hypersil C18色谱柱（5μm，100mm×4.6mm）；流动相：甲醇-水（22：78）；检测波长：250nm；柱温：30；流速：1.0ml/min。 2.2 溶液的配制 精密称取在五氧化二磷中干燥18h的葛根素对照品0.0692g，置50ml量瓶中，加30%乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液（0.1384mg/ml）。 取本品适量研细，取约1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加30%乙醇20ml,称定重量，超声处理30min，取出，放冷，再称定重量，用30%乙醇补足减失的重量，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，取滤液作为供试品溶液。 按处方比例及生产制备方法，制备不含葛根素的阴性样品，照上述供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液。 2.3 选择性试验 按上述色谱条件，分别精密吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性对照溶液各5μl，注入色谱仪，结果见图1。样品中葛根素峰与杂质峰完全分离，阴性对照无干扰。 2.4 线性关系的考察 精密吸取对照品溶液（0.1384mg/ml）1、2、4、6、8、10μl进样测定，以葛根素的进样量（μg）为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程为A=3876.9859C-53.9350,r=0.9997。说明葛根素在0.1384～1.384μg。 2.5 精密度试验 精密吸取同一对照品溶液5μl，重复进样5次，测定其峰面积积分值，结果得RSD=0.78%。 2.6 稳定性试验 分别精密吸取同一供试品溶液10μl，于0、1、2、4、8、24h进样，测定其葛根素峰面积积分值。结果表明，供试品溶液在24h内峰面积积分值基本稳定，RSD=2.12%。 2.7 重复性试验 取同一批号样品5份，分别按上述条件，测定其葛根素含量。结果平均含量为1.346mg/g,RSD=0.83%。 2.8 加样回收率试验 精密称取已知含量的样品（1.346mg/g）约0.5g，共6份，分别精密加入葛根素对照品溶液（0.712mg/ml）0.8、0.8、1.0、1.0、1.2、1.2ml，然后按上述 方法 制备供试品溶液，并测定其含量，结果平均回收率为99.84%，RSD=1.65%，见表1。表1 回收率试验结果 2.9 样品测定结果 取不同批号的样品1.0g，按2.2项下方法制得供试品溶液，