RPHPLC法测定金柴黄颗粒中黄芩苷的含量.docVIP

RPHPLC法测定金柴黄颗粒中黄芩苷的含量 【摘要】 [目的]建立金柴黄颗粒中黄芩苷的含量测定方法。[方法]采用高效液相色谱法测定金柴黄颗粒中黄芩苷的含量。[结果]黄芩苷进样量在0.157～1.256μg范围内线性关系良好，r=0.9997，平均回收率为101.31%，RSD=1.26%。[结论]所建立的方法可准确、快速地进行定性、定量检测。可用于该制剂的质量控制。 【关键词】 金柴黄颗粒;黄芩苷;RPHPLC法 　　Abstract: [Objective] To establish the contents determining means of baicalin in Jinchaihuang granules.[Methods] Baicalin was carried out by HPLC .[Results] Baicalin showed a good linear relatiaoship at a range of 0.157～1.256μg,r=0.9997.The average recovery was 101.31%,and RSD was 1.26%.[Conclusion]The methods are accurate and quick, and can be used for the quality control of Gujingdan granules. 　　Key words:Jinchaihuang granules;baicalin;RPHPLC 　　金柴黄颗粒由金银花提取物、黄芩提取物、柴胡提取物组成，处方在柴黄颗粒及银黄口服液的基础上进行仿创结合组合而成[1]。具有清热消炎作用，用于感冒，急慢性扁桃体炎，急慢性咽喉炎，上呼吸道感染等。为建立其质量标准，本文采用采用高效液相色谱法测定黄芩苷含量[2]。为金柴黄颗粒的质量标准研究提供了定性和定量的检测方法。 　 　1 仪器与试药 　　仪器:Agilent1100;十万分之一分析天平;超声波清洗器。试药:黄芩苷对照品购于 中国 药品生物制品检定所;样品:金柴黄颗粒、阴性样品自制。 　 　2 方法与结果 　　2.1 黄芩苷含量测定 (1)色谱条件：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂ODS柱(DiamonsilTMC18 5u 200×4.6) 柱温：室温;流动相：甲醇水冰醋酸(5050∶1);流速：1.0ml/min检测波长：274nm。 　　2.2 对照品溶液的制备 精密称取黄芩苷对照品适量，置容量瓶中加甲醇使溶解，摇匀,制成每1ml含62.8μg溶液，即得。 　　2.3 线性关系考察 分别精密吸取对照品溶液各2.5、5、10、15、20μl溶液，注入液相色谱器仪中，测定色谱峰面积，以进样量为横坐标，色谱峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，经线性回归，回归方程为： 　　Y=1297.3X+11.73r=0.9997 　　由测定结果提示，黄芩苷进样量在0.157～1.256μg范围内线性关系良好。 　　2.4 精密度试验考察 分别精密吸取同一供试品溶液5μl，重复进样5次，结果所得黄芩苷含量RSD=1.25%。 　　2.5 重复性试验考察 取五份同一批样品，按供试品溶液制备方法制备，进行测定，结果，黄芩苷平均含量87.4mg/g，RSD为1.56%。 　　2.6 稳定性试验考察 取同一供试品溶液，按0、2、4、6、8h时间间隔，分别进样分析，测定色谱峰面积，结果黄芩苷在8小时内稳定，RSD=1.97%。 　　2.7 回收率试验考察 精密称取已测知黄芩苷含量样品粉末及一定量对照品(共5份)按样品含量测定项下方法操作，测定，结果：黄芩苷平均回收率为101.31%，RSD为1.26%。 　　2.8 样品测定 取绿原酸样品测定项下溶液1ml→10ml,摇匀，滤过，取续滤液，过0.45μm微孔滤膜，作为供试品溶液。分别精密吸取供试品溶液与对照品溶液各5μl，注入液相色谱仪中，测定，即得。测定结果见表1。色谱图见图1、图2、图3。表1 黄芩苷含量测定结果(mg/g) 　　3 讨论 　　黄芩苷的含量测定分别考察了甲醇水冰醋酸(4060∶1)、乙腈水冰醋酸(2575∶1)、甲醇水冰醋酸(5050∶1)，结果表明以甲醇水冰醋酸(5050∶1)为流动相较好。 【 参考 文献 】 [1] 中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国药典.(一部)[S].2005版,2005:863. 　　[2] 魏雪芳,陈杰,李卓明.复方金银花颗粒质量标准研究[J].中成药，2004,11(26):900904. 1