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【医学实验室设备】
临床分析仪器实验数据处理方法的应用
声头平
(解放军总医院医学工程中心,北京100853)
摘要实验数据处理是整个仪器分析实验的一个重要组成部分,是分析测试过程的延伸,是获得可靠分析数据和
结果的必不可少的重要环节。临床光学仪器分析方法是基于常规实验数据处理方法,本文从光学分析方法的基本原理
人手,介绍了标准曲线法、标准加入法、归一法、外标法和内标法、终点法。
目前,绝大数临床光学分析仪器都是基于光电比色法进 峰面积比,求出被测组分的含量。
行工作的。最基本的工作部件是比色计或分光光度计,是一 5外表定量法
种集加样、稀释、混合、进样、反应、比色、计算、记录、打印全部 外表定量法也称定量进样一校正曲线法,是常用的一种
或部分功能于一身的自动化仪器,而且它还需要和试剂、方法 简便、快速的定量方法。在一定操作条件下,用已知纯样配置
学紧密结合起来进行工作。 成系列标样,定量进样,然后绘制响应值(峰面积)和组分含量
1标准曲线法 的校正曲线,在分析时注入相同体积的未知样,从色谱图得出
用纯的试剂配制成各种浓度的标准溶液,喷雾测定吸光 未知样的峰面积,由校正曲线查出对应的含量,校正曲线的纵
度数值,以浓度为横坐标、吸光为纵坐标,绘制吸光度一浓度 坐标也可以是峰高。
标准曲线(两者成线性关系),在曲线上内插试样的吸光度数 6终点法
值即可求出试样的浓度,如图A所示。测定时应该注意的是: 终点法是实验室最常用的方法之一。它是反应混合物经
标准溶液浓度范围应尽可能将试液中待测元素的浓度包括在 一定时间反应后,达到平衡(终点)即在呈色反应处于稳定阶
内。浓度范围的大小应以获得合适的吸光度读数为准(不同 段时,检测其颜色对光的吸收强度,以此计算待测物的浓度。
的仪器有所不同,通常吸光度读数为0.2~0.8较合适)。测定 一点终点法的特点是使用一种或两种试剂混合后,待测
时,先由低浓度样品开始测定,然后测定高浓度样品,以免记 物与试剂的物理化学反应到达终点时,测定一次吸光度,计算
忆效应。若测定时间较长,应在实验过程中定期地用试剂空 待测物的浓度。具有代表性的实验有:总蛋白、清蛋白葡萄糖
白溶液和标准溶液检查和校正仪器零点(或基线)的漂移与稳 氧化酶法等,手工操作大多数是一点终点法。
定性。此外,每次分析都应重新绘制工作曲线。 二点终点法也称固定时间法,它可以用一种或二种试剂。
这种方法的优点是可以消除样品、试剂的颜色、浊度以及一些
:..
●·● 干扰物质对测定的干扰。如果是单试剂,在样品与试剂混合
后的延滞期后读取Al,一定时间后读取A2,A=A2一A1,然后
·
:: // 比较标准和测定的A值,求的待测物的浓度。Ja&氏法测定
矽. 肌酐就是一个典型的单试剂二点法的例子。
曙^标准曲缝涪 双波长法不仅适用于终点法,也可用于动态监测法。其
2标准加入法 原理是检测计在对一待测物进行检测时,同时用两个波长检
当试样的基体效应对测定有影响
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