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　　Epstein论文 李昂，张晓实，王家祥，赵松，赵高峰，胡伟，秦建军，殷德涛 【关键词】 鼻咽肿瘤 Expression of EpsteinBarr virus RPMS1 gene in nasopharyngealcarcinoma and its subcellular location in vitro 【Abstract】 AIM: To investigate the expression of RPMS1 mRNA in biopsies of nasopharyngeal carcinoma (NPC) in the area tissues and cells. Nested PCR plify the S1 coding sequence (CDS) amplified from NPC tissues id by lipofectin mediation, HEK293 cells icroscope to observe the expression of RPMS1 and its subcellular fraction. RESULTS: Except for BJAB cells, EBV S1 expressed in 83.3%（45/54） NPC biopsies and 4%（1/25）noncarcinoma nasopharynx biopsies but no RPMS1 mRNA phocytes of NPC. RPMS1 expressed at loid of epithelial cell in vitro, suggesting that RPMS1 may function as a nuclear transcriptional factor by regulating the signal conduction related a; EpsteinBarr virus; RPMS1; green fluorescence protein 【摘要】 目的：了解RPMS1基因在鼻咽癌组织中的表达特点.freelRNA在鼻咽癌组织中的表达率为83.3%（45/54），在鼻咽非癌组织中则仅为4%（1/25），二者有显著性差异（P 0.001），鼻咽癌外周血淋巴细胞中未检测到RPMS1表达，RPMS1在SUNE1细胞中的表达高于Raji细胞，但不表达于B95.8细胞；RPMS1可稳定表达于HEK293细胞，其编码蛋白的表达以胞核为主. 结论：EB病毒RPMS1基因在高发区鼻咽癌组织中存在高水平转录，在体外可稳定表达于上皮细胞的胞核，提示RPMS1编码蛋白可能作为核转录因子通过调控细胞增殖相关的信息传递而参与上皮癌变过程. 【关键词】 鼻咽肿瘤；EpsteinBarr病毒；RPMS1基因；绿色荧光蛋白 0引言 EB病毒的潜伏感染与多种肿瘤的发生发展相关，尤其与鼻咽癌关系密切，属Ⅰ类致癌物［1］. BARTs是EB病毒潜伏感染时表达最为广泛的基因家族之一. BARTs转录于EB病毒潜伏感染的多种细胞和肿瘤，尤其高表达于上皮细胞和上皮源性肿瘤如鼻咽癌［2,3］，在淋巴细胞中却呈低水平表达或不表达 ［3,4］，提示该基因在EB病毒的生物学活动中可能具有重要作用. 目前尚不清楚RPMS1基因在高发区鼻咽癌组织中的表达状况、编码蛋白质的亚细胞定位及其生物学功能. 我们检测RPMS1基因在广东高发区鼻咽癌组织中的表达，并构建该基因的融合表达质粒，以绿色荧光蛋白（green fluorescence protein，GFP）为标记物观察该基因编码蛋白质在上皮细胞中表达的亚细胞区域，为进一步研究该基因的生物学特性及其作用机制提供依据. 1材料和方法 1.1材料 1.1.1鼻咽活检组织、细胞、质粒和菌株鼻咽活检组织和血液标本来自中山大学肿瘤医院收治的患者. 鼻咽癌54例，主要为低分化鳞癌；鼻咽非癌对照25例，均为黏膜慢性炎症. 鼻咽癌患者外周血14例. 所有病例均经病理学检查确诊. 各细胞系：SUNE1为鼻咽癌体外传代细胞系，B958为EB病毒转化的枭猴B淋巴细胞系，Raji为EB病毒阳性的Burkitts淋巴瘤细胞系，BJAB为EB病毒阴性的Burkitts淋巴瘤细胞系，人胚肾上皮（human embryo kidney, HEK293)为腺病毒体外永生化的人胚肾上皮细胞系. JM109大肠杆菌和pGEMT easy vector购自Promega公司；pEGFPC2质粒购自Clontech公司. 1.1.2主要试剂应用试剂包括TRIzol Reagent （Gibco），Reverse Trancription System （Promega），T4 D