食用菌菌种标准使用指南.pptVIP

母种感官检验（三） 5.3菌丝体表面 　　肉眼观察菌丝体是否生长均匀、平整，有无角变现象。 5.4菌丝分泌物 　肉眼观察有无分泌物，如有则记录分泌物的颜色和数量。 5.5菌落边缘 　肉眼观察菌落边缘是否整齐。 5.6杂菌菌落 　用放大镜观察菌丝体颜色和外观形态，根据颜色和形态是否有差异判定是否有杂菌菌落。 * 母种感官检验（四） 5.7虫（螨）体 　用放大镜观察培养物上有无虫（螨）体。 6.斜面背面外观 　根据培养基是否与试管相脱离判断是否干缩；在充足的光线下，对着光源方向，观察颜色是否均匀，有无色素和暗斑。 7.气味 　在无菌条件下打开棉塞（或无棉塑料盖），闻试管内气味是否正常。 * 菌种退化在母种阶段的表现 1.菌落形态不正常，如本来菌落平展的品种表现为菌落紧皱；丝状的气生菌丝变为雪花状；气生菌丝变多或变少甚至没有了；菌丝色泽变化，如多数种和品种在母种斜面上菌丝呈白色，退化了品种常呈现微黄色、浅褐色或其他色泽，或由鲜亮变暗淡； 2.菌丝倒伏，生长势弱； 3.长速变慢,过快或过慢都是不正常的； 4.个体间长速和长相不均一； 5.色素的出现。多数食用菌菌种在母种阶段不形成色素,如果出现色素,说明品种退化严重。 * 四、试验方法 微生物学检验 菌丝生长状态和锁状联合用≥10×40的光学显微镜对培养物的水封片进行观察，每一检样应观察不少于50个视野。 细菌检验：取少量疑有细菌污染的培养物，按无菌操作接种于(营养肉汤培养液)GB/T 4789.28，25℃-28℃振荡培养1d-2d，观察培养液是否混浊。若混浊，则有细菌污染。 霉菌检验：取少量疑有霉菌污染的培养物，按无菌操作接种于(PDA)GB/T 4789.28，25℃-28℃培养5d-7d，菌落出现白色以外的杂色者，或有异味者为霉菌污染。必要时进行水封片进行观察。 * 菌丝生长状态 取干净载波片，滴1滴无菌水，用无菌操作方法挑取少量菌丝涂于水滴中，盖上盖玻片，置于10×40显微镜下观察菌丝形态，是否粗壮、丰满、均匀，是否有锁状联合。 每一检样应检查不少于50个视野。 * 锁状联合 * 杂菌—细菌检验 根据不同菌种选择适用的方法 1.1 在无菌条件下，挑取少许疑有细菌污染的培养物接种至肉汤培养液中，于25~28℃振荡培养1~2天，观察培养液是否浑浊，若浑浊则有细菌污染，澄清透明为未污染细菌。 1.2 在无菌条件下，挑取可疑或有代表性的样品，接种于肉汤培养基斜面或平板 ，于25~28℃振荡培养1~2天，观察培养基斜面是否有细菌菌落长出，有细菌菌落长出者做显微镜检查，确认是细菌，则判定为细菌污染；否则为无细菌污染。 * 杂菌—霉菌检验 挑取少许可疑的霉菌污染的培养物或有代表性的样品接至PDA培养基中，于25~28℃培养4天，出现其他色泽的菌落或其他形态的菌落或有异味的为霉菌污染物，必要时进行水封片镜检。 * * 四、试验方法 菌丝生长速度 母种： PDA 24 ℃ ±1℃ 原种和栽培种：规定的培养基 （24 ℃ ±1℃）计算长满天数。 * 母种生长速度检测方法 菌种不同,对母种生长速度的测定方法和要求亦不同： 选择A.1或A.2培养基配方，配制后按菌种生产标准要求分装于试管（18×180 mm或20×200 mm）中，121℃灭菌30min， 取出摆成斜面或制备培养基平板（90mm），冷却，随机抽取10~20支斜面或3个培养基平板置于28℃±2℃培养24小时，确认灭菌良好后使用。 将待检菌种接种于PDA培养基或CPDA培养基上，接种块（3~5）×（3~5） mm，置于斜面中央偏下或培养皿中央，恒温培养箱适宜条件下培养，计算长满斜面的天数。三个重复。 * 四、试验方法 母种农艺性状和商品性状 将被检母种制成原种。 规定的培养基； 菌棒45根 接种后，分三组进行管理 做好栽培记录 与该母种的出发菌株设为对照 黑木耳 含水量62％±2％ 双孢蘑菇 含水量68％360kg ，分3组，每组2m2 双孢蘑菇 酯酶同工酶 母种长满所需时间 总产 原种长满所需时间 单产 菌棒长满所需时间 单菇质量 第一潮产量最高的时间 生物学效率 第二潮产量最高的时间 菇形、质地、色泽 产菇盛期持续的时间 菇盖直径、厚度、柄长、柄直径 * 四、试验方法 母种农艺性状和商品性状 判定： 以时间计的项目，不得推迟5d（含5d） 产量显著低于对照的； 子实体形态明显与对照不同或畸形的 * 四、试验方法 留样 各级菌种均要留样备查 留样数量： 3-5支（瓶），于4℃～6℃ 时间： 香菇：母种、原种 7个月；栽培种5个月 平菇：母种5个月、原种 4个月；栽培种2个月 黑木耳：母种、原种 6个月；栽培种4个月 双孢蘑菇：母种5个月、原种 4个月；栽培种2个月 * 五