常规透射电镜送样须知 ——动物组织.PDFVIP

常规透射电镜送样须知 ——动物组织 请 按 要 求 取 材 1) 取材大小： 心肌、肝、脾、肺、肾、脑组织等：取米粒大小，2-3 块 平滑肌、骨骼肌、神经、血管、皮肤、消化道等定向标本： 取 1×1×2mm3 3 或 0.5 ×0.5 ×1mm 的长条形标本 2-3 条；标 本尽量去掉多余成分，例如要皮肤的真皮层，须去掉角质层 和脂肪，反之亦然. 2) 取材方法：动物麻醉后，先剪下一块尽量小的组织，在预置 4 ℃ 2.5%戊二醛的塑料板上使用手术刀或双面刀片切成长条、如 果组织厚度≤1mm，直接切成 0.5~1 ×1~2mm 的长条，投入 盛有 4 ℃ 2.5% 戊二醛的 5ml 圆口圆底离心管中继续4 ℃固定 4~24h 后送电镜室。如未送检，用 PBS 替换戊二醛，继续于 4 ℃ 冰箱静置。 3) 取材要求： 除标本的大小及方向要求外，必须注意以下要求 ①取内脏组织的动物能灌注固定最好，脑及神经等尽量灌注 固定； ②取材速度要快，尽量在3min内完成； ③所用刀剪须锋利，避免对标本拉锯、挤压； ④戊二醛固定剂保持低温； ⑤标本取材位置一定要准确，如做肾小球需要取到皮质以确 保标本有小球； ⑥容器：使用 3~5ml 圆口圆底 EP 管见下图（圆底的对样品 渗透均匀），标本一定要浸没于固定液。 *注意：送检样品请使用小标签纸做标签，用中性笔注明姓名和样品 编号；严禁使用记号笔以免被洗脱。 常规透射电镜送样须知 ——培养细胞 请 按 要 求 取 材 6 1) 细胞数：10 个/mL 或 25mL 培养瓶达到生长面积的 80%，贴 壁细胞使用细胞刮刮下细胞或消化液消化细胞； 2) 使用 4 ℃的PBS(0.2M pH7.4)或生理盐水对细胞进行离心漂洗 2-3 次。离心速度 800rpm 5min/次； 3) 使用 1.5mL EP 管将漂洗好的细胞在 1500~2000 rpm 离心 10min 成肉眼可见的约 0.5-1mm 高细胞团块，切勿超出 1.5mm； 4) 贴壁加入 500μl 4℃ 2.5% 戊二醛，避免震荡；于 4 ℃ 冰箱静 置 3 天，送电镜室。如未送检，自行吸出戊二醛，加 PBS 继 续于 4 ℃ 冰箱静置。 *1、：送检样品请使用小标签纸做标签，用中性笔注明姓名和样品编 号；严禁使用记号笔以免被洗脱。 2、藻细胞的处理同培养细胞。