HPLC法测定阿奇霉素散剂的含量论文.docVIP

　　HPLC法测定阿奇霉素散剂的含量论文 【摘要】 目的 建立HPLC法测定阿奇霉素散剂的含量。方法 采用C8柱，以0.045mol/L磷酸二氢胺溶液∶乙腈(2∶1)(用三乙胺调pH至7.35)为流动相，流速1ml/min，检测波长210nm，柱温40℃。结果 阿奇霉素的线性范围为50.3～1006μg/ml，平均回收率100.1%，r=1.0000，RSD=0.8%(n=9)。结论 HPLC法测定结果与微生物检定法比较无显著性差异。本方法可准确、快速、简便地测定阿奇霉素散剂的含量。 【关键词】 高效液相色谱法； 阿奇霉素散剂； 含量测定 Content determination of azithromycin poethod for the determination of azithromycin poatographic conditions n, 0.045 mol/L ammonium phosphate monobasic solution∶acetonitrile (2∶1) (adjusted to pH7.35 ine) as mobile phase, temperature: 40℃, the flol/min, detection . Results The linear range l (r=1.0000),.freelean recovery (n=9) ethod is rapid, simple and accurate to determine the content of azithromycin poycin poination 阿奇霉素为氮杂内酯类抗生素.freelg)及红霉素对照品(130307200215，923u/mg)均由中国药品生物制品检定所提供； 阿奇霉素散剂规格为0.25g(以阿奇霉素计，批号030601，030602，030603)由安徽安科药业股份有限公司生产；纯化水，乙腈(色谱纯)，磷酸二氢铵(分析纯)。 2 色谱条件 色谱柱：Eclipse XDBC8柱(4.6mm×150mm，5μm)；流动相：0.045mol/L磷酸二氢铵溶液∶乙腈(2∶1)(用三乙胺调pH至7.35)；流速：1ml/min，检测波长：210nm，柱温：40℃。在上述色谱条件下，十六醇、蔗糖等辅料、阿奇霉素对照品、供试品及阿奇霉素与红霉素对照品溶液的色谱图见图1。 3 方法与结果 3.1 方法的专属性考察 精密称取阿奇霉素对照品20mg，分别置10ml容量瓶中，进行如下破坏试验：①酸破坏：加入0.1mol/L的盐酸溶液溶解并稀释至刻度， 室温放置2h； ②碱破A：辅料空白； B：阿奇霉素对照品； C：供试品； D：阿奇霉素与红霉素对照品(1：阿奇霉素； 2：红霉素) 图1 HPLC色谱图 略 坏：加入0.1mol/L氢氧化钠溶液溶解并稀释至刻度，制成约2mg/ml的溶液，室温放置2h；③氧化破坏：加入5%双氧水溶解并稀释至刻度，室温放置2h；④热破坏：60℃加热破坏6h，加流动相溶解并稀释刻度。按上述色谱条件进样记录图谱(图2)，结果表明阿奇霉素对热较稳定，其它条件均不稳定，破坏产生的各相关杂质峰与主峰均能基线分离，说明该色谱条件能准确测定阿奇霉素的含量。 3.2 线性关系 精密称取阿奇霉素对照品，加流动相溶解并稀释，摇匀，制成2mg/ml的储备液。精密量取储备液0.5、1、2.5、5、10ml分别置于10ml容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，在上述色谱条件下分别进样20μl，每一组浓度进样3次，记录峰面积。以阿奇霉素素对照品浓度x(μg/ml)对色谱峰面积y绘制标准曲线，其回归方程为：y＝0.4791x-1.7562 r=1.0000 结果表明，阿奇霉素浓度在50.3～1006μg/ml范围内呈良好线性关系。 3.3 进样精密度 对同一份对照品溶液，连续进样6次，按上述色谱条件测定峰面积，RSD为0.07%。 3.4 稳定性试验 取上述溶液分别放置0、1、4、6、8和12h后测定，其峰面积基本一致，RSD为0.8%，表明溶液在12h内稳定。 3.5 最低检测限 按信噪比3∶1计，阿奇霉素的检测限为60ng。 3.6 加样回收率试验 精密称取份已知含量的同一批号的样品，各置50ml容量瓶中，分别加入精密称定的阿奇霉素对照品，用流动相制成相当于含量测定浓度的80%、100%和120%的溶液，3个浓度各测定三次，计算回收率，低、高、中三种浓度回收率分别为99.2%、100.8%和100.4%；RSD分别为0.66%、0.75%和0.36%，得平均回收率为100.1%。因此选取得高效液相色谱法准确度较好。 3.7 样品含量