HPLCELSD法测定注射用硫酸异帕米星含量论文.docVIP

　　HPLCELSD法测定注射用硫酸异帕米星含量论文 【摘要】 目的 建立高效液相色谱蒸发光散射检测(HPLCELSD)法测定注射用硫酸异帕米星含量的方法。方法 色谱柱为Zorbax SBC18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为1%三氟醋酸水溶液甲醇(体积比95∶5)),流速:0.5 mL/min; 蒸发光散射检测器,漂移管温度45 ℃,载气压力368 Pa。结果 异帕米星在0.1~0.8 mg/mL的范围内呈较好的线性关系(r=0.9995),平均回收率101.0%,RSD=0.32%;系统精密度RSD=0.34%。结论 本方法操作简便、快速，方法的精密度、准确性、重现性均较好地满足质量控制的要求，可用于注射用硫酸异帕米星的质量控制。 【关键词】 高效液相色谱法; 蒸发光散射检测器; 硫酸异帕米星 Abstract:Objective To establish an HPLCELSD method for the quantification of isepamicin sulfate in the injection. Methods The analysis ed on a column of Zorbax SB C18 (250 mm×4.6 mm, 5 μm ). The mobile phase consisted of 1% tifluoroaceticmethanol (95∶5)and the floL·min-1. The drift tube temperature g/mL (r=0. 9995). The average recovery ethod is simple, rapid, accurate and reproducible for the quality control of the injection of isepamicin sulfate. Key icin sulfate 硫酸异帕米星为氨基糖甙类抗生素,由庆大霉素B半合成而来，目前仅在日本抗生素基准解说（简称“日抗基”）中收载。“日抗基”中采用抗生素微生物检定法测定硫酸异帕米星的含量,操作烦琐、测定误差较大。由于氨基糖甙类抗生素无紫外吸收,.freelm×4.6 mm,5 μm)。三氟醋酸为TEDIA PANY INC产品,分析纯;水为自制双蒸水。硫酸异帕米星标准品（规格：684 mg/g,批号：050701）及注射用硫酸异帕米星由海南长安国际制药有限公司提供。 1.2 色谱条件采用1%三氟醋酸水溶液甲醇(体积比95∶5)为流动相,流速为0.5 mL/min;ELSD检测器漂移管温度为45 ℃, 载气压力368 Pa;进样量20 μL。 1.3 溶液的配制 1.3.1 标准品溶液的配制 取硫酸异帕米星标准品,精密称定,用水溶解,分别制成浓度为0.3、0.4、0.5、0.6、0.7 mg/mL的标准溶液,每个浓度平行配制2份。 1.3.2 供试品溶液的配制 取供试品注射用硫酸异帕米星,精密称定,用水溶解,制成浓度为0.5 mg/mL的溶液,平行配制6份。 1.4 方法学考察 1.4.1 线性关系 精密称取异帕米星对照品适量,加水制成含注射用硫酸异帕米星0.1、0.2、0.4、0.6及0.8 mg/mL的溶液, 分别进样20 μL, 以浓度的常用对数（X）为横坐标,以峰面积的常用对数（Y）为纵坐标作图,计算得回归方程：Y=1.249 6X+5.663，r=0999 5。结果表明异帕米星在0.1~0.8 mg/mL的范围内呈较好的线性关系。 1.4.2 精密度试验 取对照品溶液,连续进样6针,以主峰峰面积计算RSD为0.34%。 1．4．3 稳定性试验 取供试品（批号051101）溶液,分别于0、1、2、4、6、8 h取20 μL,注入液相色谱仪,记录色谱图,结果RSD为0.78%。 1．4．4 重复性试验 取同一批供试品（批号051101）.freelL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，取20 μL注入液相色谱仪进行测定,计算回收率，测得回收率分别为100.8%、100.9%和101.4%，平均回收率为101.0%，RSD为0.32%,表明回收率良好。 2 含量测定结果 采用本法测定3批注射用硫酸异帕米星的含量；按企业申报的质量标准测定方法，采用微生物检定二剂量法测定注射用硫酸异帕米星的含量，结果见表1。结果表明两种方法的含量测定结果非常接近。硫酸异帕米星供试品溶液的色图谱见图1。 3 讨论 3.1 本文所建立的HPLCELSD方法与目前中国药典采用的效价方法及英、美等国家采用的衍生化方法比较，具有以下优点:不需要进行衍生化，减少了样品前处理所带来的误