食品级乳酸菌高效表达载体系统的研究进展.pdfVIP

中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第三届第八次学术研讨会论文集 (2006年广州) 食品级乳酸菌高效表达载体系统的研究进展· 郝凤奇 王春凤 (吉林农业大学动物科技学院 吉林省长春市新城大街2888130118) 摘要:本文在乳酸菌表达载体构建的以往研究基础上，本文综述T食品级乳酸菌高效表达载体系统 的研究进展. 关键词:食品级 乳酸菌 表达载体 ResearchAdvancementinFood-gradeHigh-levelExpressionSystemofLacticAcidBacteria FengQiHao ChunFengWang CollegeofAnimalScienceTechnology,JilinAgriculturalUniversity. No.2888ofXinChengStreet,ChangchunCityJilinProvince130118. Abstract:ConsiderableadvanceshavebeenmadeinthegeneticsandmolecularbiologyofLacticAcid Bacteria(LAB).Thetypeofthefood-gradehigh-levelexpressionsystemaswellasdevelopmentofLAB wasreviewedonthebaseofpreviousworkinthisarticle. Keywords:Food-grade LAB ExpressionSystem 表达载体(expressionvectors)是指能使克隆在其中特定位点的外源基因的编码序列，在受体菌 中正常转录并转译成相应蛋白质的克隆载体。目前，世界范围内将传染病的致病机理己经研究到基 因水平。所以，基于免疫学的理论，能否构建出高效表达载体是制约成功研制基因工程疫苗的瓶颈。 迄今为止多数外源基因的克隆与表达，主要采用大肠杆菌，由于大肠杆菌能够不同程度的引起人类 和动物发生腹泻，导致机体损伤，所以其表达产物需要经过复杂的分离纯化才能达到食品医药标准。 与之相比，乳酸菌作为肠道内正常菌群之一，因其安全、没有毒素，故表达的外源蛋白无需经过纯 化可以直接连同菌体一起服用。再者乳酸菌可以在肠道中存活定植，口服基因功能乳酸菌后，乳酸 菌表达的用于治疗或免疫作用的蛋白就可以源源不断地在肠道中生产并起到相应的保护性作用。 乳酸菌通常认为是一类能够代谢糖类，产生50%以上乳酸的细菌的总称，属革兰氏阳性厌氧菌。 最近十几年来对乳酸菌遗传学方面的研究己取得了巨大的进步，从而导致乳酸菌作为遗传工具、转 化载体、整合和扩增系统而被广泛的应用。基于传统乳酸菌表达外源蛋白效率低以及迄今为止报道 的人和动物消化道共生乳酸菌表达载体系统，均是以抗生素抗性作为外源基因稳定表达的压力，而 抗药性基因不断向环境中漂移扩散，可能造成对环境微生态的破坏，不能直接用于人和动物的弊端， 国内外的学者一直致力于研究高效的对人和动物无毒副作用的乳酸菌表达载体。现有的研究结果表 明，已经构建了一些高效载体、整合系统、扩增系统:并将这些能够耐受压力和安全选择的表达系 统应用于食品工业，故此得名为食“品级表达载体”。而且，有关乳酸菌功能及表达系统的基因和操 纵子序列也已作了大量的研究工作.随着对乳酸菌基因组学的研究，在上世纪末就已经公布了乳酸 乳球菌(Lactococcuslactis)的全部基因组序列，随即也展开了其他乳酸菌基因组序列的研究。从科学 研究、工业生产及环保的角度来讲，我们应力求构建食品级乳酸菌高效表达系统。 食品级乳酸菌的表达系统按照基因组内启动子((promoter)的类型可以分为组成型表达系统 (constitutiveexpressionsystem)和诱导型表达系统(controlledorinducibleexpressionsystem)。组成型表 达系统的启动子可以不停地启动基因的表达，而诱导型表达系统则是其启动子上携带某种选择标记， 仅当环境中存在相应的诱导物时方能启动表达。 .基金项目:国家863计划(No.2003人A241121002):吉林省科技厅项目N(oM;家自然科学基金(NoNo; 吉林省杰出青年基金 (No;中