脂肪酶活测定.docVIP

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脂肪酶活测定

脂肪酶活测定 脂肪酶在一定条件下,将甘油三酯水解。在不同水解阶段可分别产生脂肪酸、甘油二酯、甘油一酯及甘油。水解所产生的脂肪酸可以用标准的氢氧化钠滴定,用滴定值表示酶活力。酸碱滴定法 酶活力以国际单位表示,即在一定条件下,脂肪酶水解脂肪每分钟产生1微克分子脂肪酸的酶量定为一个国际单位。脂肪酶活力单位=(A-B)*n/t*v 式中: A为样品耗碱液ml数, B为对照组耗碱液ml数为每毫升碱液微克分子数,f为稀释倍数t为作用时间 (分)挥发性脂肪酸(VFA)的测定 滴定法分析 1原理:将废水以磷酸酸化后,从中蒸发出挥发性脂肪酸,再以酚酞为指示剂用NaOH溶液滴定馏出液。废水中的氨态氮可能对测定形成干扰,因此应当首先在碱性条件下蒸发出氨态氮。 4. 计算 挥发性脂肪酸含量计算如下: VFA=V (NaOH)*C*1000/Vs (mmol/L) 式中:V(NaOH)-----滴定消耗的NaOH标准溶液的体积,ml; c ------ 滴定消耗的NaOH标准溶液的准确浓度,mol/L; Vs--------被测废水水样的体积,ml. 淀粉水解酶淀粉的水解产物麦芽糖及其他还原性糖能与3,5-二硝基水杨酸试剂反应,使其还原生成红色3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内,其颜色深浅与淀粉酶水解产物的浓度成正比,可用麦芽糖(或葡萄糖)浓度表示,用比色法测定淀粉生成的还原糖的量,以单位样品在一定时间内生成的麦芽糖的量表示酶活力。 纤维素酶酶活力测定: 原理:纤维素酶水解纤维素,产生的纤维二糖、葡萄糖等还原糖,能将3,5-二硝基水杨酸中硝基还原成橙黄色的氨基化合物,在550nm波长处有最大光吸收,在一定的范围内,还原糖的量与反应液的颜色强度成比例关系,利用比色法测定其还原糖的量就可测定纤维素酶的活力。 酶活单位定义为;在上述反应条件下,每分钟酶解CMC释放出lug的还原糖(葡萄糖)所需酶量为一个酶活力单位。 纤维素水解酶

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