高压均质法提取云芝胞内糖肽.pdfVIP

2010(3) 噍嗣萄 加鼬n 藏睁 工妒 曩■蚕 高压均质法提取云芝胞内糖肽 钱 强1 陆震鸣2许泓瑜p (1江苏苏中药业集团股份有限公司，江苏姜堰，225500；2江南大学医药学院制药工程研究室，江苏无锡214122) 摘要 采用高压均质法破碎液态发酵法牛产的云芝菌丝体， 液体种子培养基中，28℃，160r／min，培养5d后，接种3．5L发 分析其对产品含量及得率的影响。以云芝胞内糖肽多糖含量为 酵培养基内，接种量为10％，搅拌转速150—500dmin，通风比 指标，采用k(33)正交试验法，确定了提取云芝胞内糖肽最佳工 1：0．6，温度28℃，培养4d，装液量3．5L，罐压O．2MPa。发酵液 艺为均质压力120MPa，料液比l：20，均质次数1次。与传统水过滤获得菌丝体，去离子水洗涤后用于制备云芝胞内糖肽。 提法比较，高压均质法能明显提高云芝胞内糖肽的得率。 1．5水提取法提取云芝胞内糖肽云芝菌丝体以料液比 关键词 云芝深层发酵胞内糖肽 高压均质法 l：50加入去离子水(pH7．0)，煮沸2h，滤液经减压浓缩至原 文章编号 1000—8357(2010)03-0067-02 体积l，3。浓缩液中加入3倍体积无水乙醇进行沉淀，沉淀过 云芝(Cor／olus versicolor(L)Fr)味甘、淡，性微寒，有健脾滤烘干得云芝胞内糖肽体[61。 利湿，止咳平喘，清热解毒，抗肿瘤的功效llI。现代药理研究表 1．6高压均质法制备云芝胞内糖肽云芝菌丝体以料液比 明云芝胞内糖肽为该菌的主要有效组分，具有抑制肿瘤、抗溃 7．0)。采用高压均质机进行破碎，均质 1：20加入去离子水(pH 疡、保肝、抗病毒、降血脂、抗衰老等多种药理作用I习。 压力120MPa，均质次数为1次。均质液中加入3倍体积无水 据报道，高压破碎提取可以大大提高有效成分的提取得 乙醇进行沉淀，沉淀过滤烘干得云芝胞内糖肽。 率，具有操作步骤简单、自动化程度高、节省水、电、煤的消耗 1．7质量指标的测定 等特点。该技术利用高压条件下的混悬液，通过调节限流缝隙 1．7．1 总糖、还原糖和多糖含量测定 总糖含量测定采用苯 过程中失压、膨胀、爆炸、剪切和高速撞击等综合效应，将在液 酚一硫酸法，还原糖含量测定采用DNS法。多糖含量／％=总糖 体中的颗粒粉碎至直径0．1～2斗m，平均直径1pm，这个过程 含量，％一还原糖含量／％，均为国家药品标准(WS-XG枷121- 集超声波粉碎、胶体磨、球磨功能于一体，颗粒面积的增大及 2002)所提供的方法。 高压带来的综合效应，极大地加速r可溶物的渗透和扩散[31。 1．7．2云芝糖肽含量测定福林酚试剂法，国家药品标准 目前，高压均质机已经广泛用于食品，药品，化妆品等行业嗍， (WS—XG_02l一2002)所提供的方法。 但围内外采用高压均质法提取云芝包内糖肽尚届空白。试验 1．7．3相对分子质量的测定采用高效凝胶渗透色谱法 采用高压均质技术对云芝胞内糖肽进行提取，并对相关均质 条件进行了优化。 Linear7．8mmx300mm。 柱为UhrahudrgelTM 1材料和方法 2结果与分析 1．1菌种云芝斜面菌种购自上海农业科学院，于PDA2．1 正交法优化高压均质条件根据预试验结果，确定均质压 斜面常规传代。 力、料液比(湿菌体：水)、均质次数为影响胞内糖肽得率