药品质量标准与分析方法验证20140425.pptVIP

三、原料药及制剂分析方法的研发 试剂、化学品及对照品 溶液配制（稀释液、缓冲液、流动相、对照品和供试品溶液） 详细操作程序包括仪器参数的设置（流速、温度、运行时间、波长等） 系统适用性试验及接受标准（拖尾因子、理论板数、分离度、相对标准偏差、相对保留时间、容量因子。） 三、原料药及制剂分析方法的研发 进样序列 计算公式（对杂质检测方法包括杂质相对响应因子及定量限） 结果报告，并附典型色谱图。 HPLC含量测定及杂质分析方法 仪器设备：Agilent、Waters ，etc. 色谱柱选择：C18、C8、Phenyl(苯基)、CN（氰基）、Chiral（手性）等。 三、原料药及制剂分析方法的研发 洗脱模式：等度或梯度。 流动相组成及比率：乙腈/甲醇：水/缓冲液，等。 是否用缓冲液或离子对试剂：酸、碱、或中性成分。 缓冲剂、缓冲液pH、缓冲能力及离子强度的选择 检测器及检测波长的选择（PDA 200~400nm） 流速、进样体积、柱温。 样品溶剂（稀释剂）的选择 三、原料药及制剂分析方法的研发 样品溶液制备的振摇或超声时间 （1）HPLC含量测定方法用于原料药及制剂常规放行及稳定性研究 API活性成分应安全溶解或完全被溶剂萃取。 API活性成分峰应与杂质包括降解产物的峰完全分离。 API活性成分峰应是纯峰（不含任何杂质或降解产物重叠峰） 进行强制降解试验来表明含量测定方法具有稳定性指示能力。 三、原料药及制剂分析方法的研发 原料药峰的响应值应在检测器线性范围内。 尽可能选择原料药的最大吸收作为检测波长。 原料药出峰的保留时间通常控制在10min之内。 低成本、易操作、使用便捷。 （2）HPLC杂质测定方法用于原料药及制剂放行及稳定性研究 API活性成分应容易并完全溶解或完全被样品试剂萃取。 三、原料药及制剂分析方法的研发 API活性成分出峰时间通常控制在10min左右。 任何杂质峰/降解物峰应与溶剂峰分离（晚于死体积洗脱）。 所有杂质包括降解产物应完全从色谱柱中洗脱（检查后期洗脱峰） 进行强制降解试验来表明杂质测定方法具有稳定性指示能力。 所有杂质峰/降解物峰之间应相互分离并与API活性成分峰能完全解析（无任何杂质或降解物峰“隐藏”）。 三、原料药及制剂分析方法的研发 所选波长应能检测所有已知和未知杂质，包括降解产物。 应有足够的灵敏度能对低于或等于报告限度的所有杂质包括降解产物检测并正确定量。 低成本、易操作、使用便捷。 （3）气相色谱或顶空-气相色谱残留溶剂分析方法 气相色谱仪：Agilent 、PE、Thermo，etc. 气相色谱柱：DB-Wax、DB-624、DB-1、Capillary packed, etc. 三、原料药及制剂分析方法的研发 柱长、内径、膜厚度 洗脱模式：恒温或温度梯度。 载气：氮气或氦气。 检测器：FID 氢火焰离子检测器（氢气、空气、尾吹气）或其它检测器。（ECD、TCD、NPD等） 分流/不分流进样模式（流速、分流比） 液体直接进样或顶空自动进样器气体进样（加热、振摇以及平衡时间） 三、原料药及制剂分析方法的研发 总运行时间/GC循环时间 外标/内标法 所有被分析的成分应该具挥发性（有机挥发杂质可按残留溶剂控制） 原料药尽可能在样品溶剂中完全溶解（至少在高温下）。 被分析的残留溶剂应不受样品溶剂的干扰。 所有被分析的残留溶剂都应该能检测到并能相互分离 三、原料药及制剂分析方法的研发 以及不受样品溶剂或内标溶剂的干扰（如用内标法）。 如采用内标法，内标溶剂应选择具稳定性好并和被分析的残留溶剂性能相似。 四、原料药及制剂分析方法的验证 1、方法验证 定义：分析方法验证就是证明分析方法适用于其拟定用途（得到一致、可告和准确结果）的过程。 ICH Q2 （R1）：Validation of Analytical Procedures ;Text and Methodology FDA Guidance for Industry :Analytical Procedures and Methods Validation USP 1225: Validation of Compendial Procedures USP 1226: Verification of Compendial Procedures 四、原料药及制剂分析方法的验证 检验项目和验证内容 项目 内容 鉴别 杂质测定 含量测定及溶出量测定 定量 限度 准确度 － + － + 精密度 － － － + 重复性 － + － + 中间精密度 － +① － +① 专属性② ＋ ＋ ＋ ＋ 检测限 － －③ ＋ － 定量限 － ＋ － － 线性 － ＋ － ＋ 范围 － ＋ － ＋ 耐用性 ＋ ＋