番茄HsfA3基因功能验证中相关植物表达载体的构建.pdfVIP

第4l卷 第 10期 东 北 农 业 大 学 学 报 41(1O)：30~35 2010年 10月 JournalofNortheastAgriculturalUniversity 0ct．2010 番茄HsfA3基因功能验证中相关植物表达载体的构建 李振军，张丽丽，李景富 (东北农业大学园艺学院，哈尔滨 150030) 摘 要：以pBI121质粒为基本载体 ，分别构建了由35S启动子驱动的用于番茄 胁 3基 因亚细胞定位 (Subcellularlocation)和遗传转化的植物表达载体 pBI—sl—A3、pBI—A3。将 pBI121质粒上的35S启动子进行改造， 分别构建了植物表达载体pBI—mini35S、pBl—HSE—mini35S，用于研究热激转录因子HsfA3与热激元件(Heatshock elements，HSEs)的互作。通过冻融法将以上4种重组质粒导入根癌农杆菌LBA4404中，用于后续试验，为进一 步研究HsfA3基因在耐热中的功能和分子生物学机制奠定了基础。 关键词：番茄； 3；35S启动子；植物表达栽体 中图分类号：$641．2 文献标志码：A 文章编号：1005—9369(2010)10—0030—06 Construction ofplantexpression vectors oftomato HsfA3 gene for functionalanalysis／LIZhenjun，ZHANGLili，LIJingfu(CollegeofHorticulture，Northeast AgriculturalUniversity，Harbin150030，China) Abstract：BasedonplasmidpBI121，recombinantplasmidspBI—sI-A3andpBI-A3drivenby35S promoterwereconstructedf0rsubcellularlocationandtransformationoftomato ，_fs 3 gene．Afterthe improvementof35S promoteronplasmidpBI121，anothertwo recombinantplasmidspBI—mini35S and pBI—HSE．mini35SwereobtainedforthefurtherstudyoftheinteractionbewteenHsfA3factorandHSEs． ThenfourrecombinantplasmidsweretransformedintoAgrobacterium LBA4404byusingfreezeandthaw method，andthesematerialsprovidedthebasisforinvestigatingthefunctionandmolecularmechanism of HsfA3geneinheattolerance． Keywords：tomato；HsfA3；35Spromoter；plantexpressionvector 任何植物的生长温度都有三基点 ，即最低温 母、拟南芥、玉米、番茄、水稻等生物体中均克隆 度、最适温度和最高温度 。高温将抑制植物的光 到 HSFs 。 合作用和呼吸作用，同时造成细胞膜损伤、细胞 CaMV35S启动子是双子叶植物中最常使用的 老化和死亡f11。植物受高温胁迫后产生多种热激蛋 组成型启动子，它具有多种顺式作用元件。其转录 白，这些热激蛋 白可以作为其他蛋 白质的分子伴 起始位点上游一46～+1bp含有 TATA盒 ，是 RNA 侣 ，从而维持其他蛋 白质在高温下行使正常的功 聚合酶的结合位点，但是