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第28卷第3期 食品与生物技术学报 V01．28No．3
2009年5月 ofFoodScienceand May2009
Journal Biotechnology
文章编号：1673—1689(2009)03—0397-06
水产品三种致病菌多重PCR检测方法的建立
王娜 陶妍
(上海海洋大学食品学院，上海201306)
摘 要：根据副溶血弧茵(Vibrio
茵(S￡口户^yzDfDff“saureus)的耐热核酸酶基因(nuc)和单增李斯特菌(Listeriamonocytogenes)的
侵入关联蛋白基因(iap)分别设计引物，进行PCR扩增及反应条件的优化，建立了对3种茵的多重
PCR检测方法。结果表明：3对引物能特异性地扩增出202
bp、484bp和714bp的目的片段。优
化后的多重PCR反应体系为：10×PCRbuffer(M92+)2．5“L、200dNTP、2mmol／L
gmol／L
U
M92十、模板2“L、2．5 nmol／L、金黄色葡萄球茵40
Taq酶，引物浓度分别为：副溶血孤茵200
nmol／L、单增李斯特茵320
nmol／L，总反应液25弘L。对贝类模拟样品的检测结果显示，应用多重
PCR技术对3种菌的检测限分别为副溶血弧茵2．3×102CFU／mL、金黄色葡萄球菌2．5×101
CFU／mL、单增李斯特茵1．5×103CFU／mL。作者通过多重PCR技术实现了对副溶血弧茵、金黄
色葡萄球菌和单增李斯特菌的同时检测，具有快速、灵敏度高、特异性强等优点。
关键词：多重PCR；副溶血弧茵；金黄色葡萄球菌；单增李斯特菌
201．6 文献标识码：A
中图分类号：TS
ofaM for of
Establishment PCRDetection
ultiplex
Three of in Foods
Pathogen
Types Aquatic
WANGNa。TAOYan。
ofFoodScienceand Ocean 201306，China)
(College Technology，ShanghaiUniversity，Shanghai
this carried three of
Abstract：In PCR(MPCR)was
study，amultiplex using pairsprimer，which
were tothe thethermostabledirect
designedaccordinggenesencoding
thermostablenuclease andtheinvasionassociated fromVibrio
(TNase)
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