瓜叶绿素降解关键酶基因PPH和PAO cDNA片段的克隆与表达初步分析.pdfVIP

园 艺 学 报 2011 ，38 （6 ）：1104 –1110 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com 黄瓜叶绿素降解关键酶基因PPH 和 PAO cDNA 片段的克隆与表达初步分析 * 王 伟，徐跃进 ，万正杰 （华中农业大学园艺林学学院，国家蔬菜改良中心华中分中心，园艺植物生物学教育部重点实验室，武汉 430070 ） 摘 要：以西双版纳黄瓜和‘华黄 5 号’黄瓜叶片为试验材料，研究了衰老过程中两种黄瓜叶片叶 绿素含量变化及脱镁叶绿素脱镁叶绿酸水解酶基因 PPH 和脱镁叶绿酸 a 加氧酶基因 PAO 的表达。结果表 明：随着叶片衰老，叶绿素a 和叶绿素 b 含量显著降低，叶绿素 a 与叶绿素 b 的比值在 0.5 左右，推测叶 绿素 b 的含量可能对黄瓜叶片保绿起到重要作用。荧光定量RT-PCR 分析结果显示：PPH 和 PAO 在西双 版纳黄瓜叶片生长 35 d 时表达量最高，分别为 5.50 和 1.86；PPH 在‘华黄 5 号’叶片 35 d 时表达量最高， 为 7.14，而PAO 在 35 和 45 d 表达量都很高，分别为 3.90 和 3.91 ；PPH 和 PAO 在西双版纳黄瓜叶片中的 表达量低于在‘华黄 5 号’中。 关键词：黄瓜；叶绿素；降解；PPH ；PAO ；衰老；表达 中图分类号： S 642.2 文献标识码：A 文章编号：0513-353X （2011 ）06-1104-07 Cloning and Expression Analysis of Key Genes PPH and PAO for Chlorophyll Degradation in Cucumber * WANG Wei ，XU Yue-jin ，and WAN Zheng-jie （College of Horticulture and Forestry，Huazhong Agricultural University ；National Center for Vegetable Improvement （Centeral China）；Key Laboratory of Horticulture Plant Biology ，Ministry of Education ，Wuhan 430070 ，China） Abstract ：The change of chlorophyll content and the expression of pheophytin pheophorbide hydrolase gene （PPH ）and pheidea oxygenase gene （PAO ）were analyzed during leaf senescence of Cucumis sativus L. var. xishuangbannanesis Qi et Yuan and ‘Huahuang 5 ’. The results showed that chlorophyll a and b content decreased significantly during the leaf senescence. The ratio of chlorophyll a and b was around 0.5，suggesting that chlorophyll b content might play a role in keeping green. Real-time PCR results showed that PPH and PAO had the highest expression in leaves of xishuangbannanesis Qi et Yuan at 35 d ，with the relative expressi