河鳗中恶喹酸残留量测定方法的改进.pdf

维普资讯 第 23卷，第 4期 光 谱 实 验 室 Vo1．23，NO．4 2006年 7月 Chinese]ournalI’lSpectroscopyLaboratory July ，2 0 0 6 河鳗中恶喹酸残留量测定方法的改进 李佐卿① 倪梅林 章再婷 MY,华 俞雪钧 殷居易 湛 嘉 (宁波出入境检验检疫局 浙江省宁波市 315012) 摘 要 样品用二氯甲烷提取．除去溶剂后．残渣用稀盐酸溶液和正己烷处理以除去脂肪，然后用二 氯 甲烷萃取．挥干，残留物溶于 甲醇水溶液中．用高效液相色谱荧光检测器测定。该方法的测定低限为 0．005mg／kg．方法 的回收率范围为 82．7 一89．4 。 关键词 恶喹酸 ，河鳗 ．高效液相色谱法。 中图分类号 ：0657．71 文献标识码：B 文章编号：1004—8138(2006)04—0744—03 1 前 言 自20世纪80年代开始，恶喹酸作为治疗鱼类疾病的主要抗菌药物被广泛使用，但同时对人体 会产生细菌抗菌性并可能抑制DNA促旋酶。国外已制定恶喹酸中最大残留限量，一般为 10,／g／kg。 河鳗中恶喹酸残留量的测定已有方法口]，该方法对样品进行重氮化处理，用紫外检测器检测。作者 在实践中发现对样品进行重氮化处理比较麻烦又费时，用紫外检测器检测干扰多，灵敏度低，而用 荧光检测器测定不但不用重氮化处理，而且无杂质干扰峰，灵敏度大大提高。 2 实验方法 2．1 仪器和试剂 HPll00高效液相色谱仪 (美国Agilent公司)，配 1046A荧光检测器，旋转蒸发器、0．45~／m微 膜过滤器，乙醚、二氯甲烷、正己烷、甲醇、无水硫酸钠、盐酸、海砂、乙酸，除另有规定外，所用试剂均 为分析纯 ，实验用水为二次蒸馏水 。 2．2 试样前处理 称取经捣碎成浆的试样 5．Og于碾钵中，加入少量无水硫酸钠、海砂碾磨，用 60mI二氯甲烷碾 磨提取并挥干。残留物用 30mI(1mol／I)盐酸溶解，然后用正己烷萃取除去脂肪，最后用 60mI二 氯甲烷分 2次从盐酸溶液中将恶喹酸提取出来，二氯甲烷萃取液经旋转蒸发器浓缩，用 甲醇溶解残 渣 ，此溶液供液相色谱仪测定。 2．3 色谱条件 色谱柱 ：ODS(C18)柱，荧光检测器 ：激发波长 260nm，发射波长 380nm。流动相 ：甲醇一水 (含 2 乙酸)流速 ：0．5mI／rain，进样量 ：l0t．d。 ① 联系人．电话 ：(0574E—mail：liz(1@I】1)cl(1．0v．CI】 作者简介 ：李佐9即 【1947一)．_只、浙江省 波 }人．研究 ．_j：嘤从事食品理化检验及分析方法的开发和研究。 收稿 日期：2006—03—03；接受 日期：2O06—03—30 维普资讯 第 4期 莩似卿等： 峨巾恶峨酸残留量测定方法的改进 3 结果和讨论 3．1 荧光检测方法的采用 2O世纪 90年代初期，国际上已有用荧光检测方法测定鱼和鱼饲料中恶喹酸的报道[2]，本文 参考文献采用不经重氮化处理直接对恶喹酸进行荧光检测的方法收到良好的效果。 其优点是 ：由于不经重氮化处理节约了贵重试剂，大大简化分析步骤 ，缩短分析时间，提高工作 效率；由于很多杂质没有荧光使干扰峰大大减少，提高了分析的准确性，减少误判 ；由于荧光检测器 的灵敏度比紫外检测器高，使检出低限由0．04mg／kg降低到 0．O05mg／kg，使本方法能够达到国际 上对恶喹酸的限量要求 (0．Olmg／kg)，解决了实际问题。使用不同的检测器检测恶喹酸的谱图见图 1和图 2。 6(J 60 ： E ＼ 40 40