第十二章 各类药品检验.pptVIP

一、鉴别 1 茚三酮反应 2 双缩脲反应 3 特异性反应 抑肽酶 胃蛋白酶 二、检查 一般杂质检查：重金属 特殊杂质检查：其它酶含量限量检查 安全性检查：热原 第二节 酶类药物分析 三、酶活力测定 酶活力单位：指在规定条件下，1分钟内能转化1umol底物所需酶量，pH，缓冲液，底物浓度，温度规定值。 比活力：每克，每毫升酶制剂有多少酶活力单位。 （一）固定时间法 在最适宜条件下，一定量酶与底物共同保温一定时间，在一定的时间间隔内加入变性剂终止酶反应，测定产物生成量或底物消耗量，计算酶含量。 底物浓度降低 产物抑制作用 酶变性作用 第二节 酶类药物分析 （二）连续监测法 在酶反应过程中，连续记录不同时间底物消失量或产物生成量，计算初速度。 1 紫外分光光度法 （1）NAD，NADP连续监测法 直接光度法 偶联反应光度法 三联酶反应光度法 （2）不用NAD，NADP连续监测法，适用于反应产物有颜色，根据吸光度计算酶活力单位。 第二节 酶类药物分析 2 荧光分析法 利用酶反应产物，底物具有荧光，根据荧光强度变化检测酶反应速率。 脱氢酶NADP在中性溶液中无蓝白色荧光，而NADPH发出强蓝白色荧光。 荧光源底物酶反应 3 旋光度法 利用酶反应过程中旋光度变化。 第二节 酶类药物分析 三、固定浓度法 根据酶催化反应使反应产物达到额定的浓度时其反应时间与酶浓度成反比。 四、影响酶活力因素 温度 pH值 底物浓度 辅酶 抑制物 第二节 酶类药物分析 五、酶活力测定法设计 底物 pH值 温度 辅助因子 酶样品 空白与对照 第十四章糖类、脂类和核酸类药品检验 生命科学学院制药工程 多糖类药品检验 1 脂类药品检验 2 核酸类药品检验 3 本章内容 第十六章 糖类、脂类和核酸类药品检验 第一节 多糖类药品检验 单糖组成分析 糖苷键连接方法 糖苷键连接位置 一、单糖组成分析 1 定性鉴别 多糖水解（矿酸条件）生成单糖，在浓酸中加热脱水生成糖醛衍生物。在阿拉法-萘酚作用下，生成有色物质。 糖分子结构中，不对称碳原子具有旋光性，可用比旋度来鉴别糖类物质。 硫酸软骨素分子中具有半缩醛基结构，具有还原性，可与碱性酒石酸铜试液反应，加热，产生氧化亚铜沉淀。 第一节 多糖类药品检验 2 单糖的分离鉴定 3 单糖含量测定 纸上色谱分离 薄层色谱法 高效液相气质联用 高效液相色谱法 化学法 第一节 多糖类药品检验 二、分子量测定 高效液相色谱 ： 测多糖专用凝胶柱。 三、糖苷键连接方式 红外光谱 核磁共振谱 四、糖苷键连接位置 1高碘酸氧化法 2 Smith降解 3 甲基化试剂 4 乙酰解后质谱分析 第一节 多糖类药品检验 二、纯度分析 一般杂质检查 特殊杂质检查 三、含量测定 比色法 紫外分光光度法。 高效液相色谱 气相色谱 生物检定法 第一节 多糖类药品检验 例：硫酸软骨素 鉴别 甲苯胺蓝染色，硫酸软骨素紫红色 水解后加氯化钡产生白色沉淀 碱性酒石酸钾产生红色沉淀 检查 一般杂质：氯化物、硫 特殊杂质：蛋白质、核酸 含量测定 比色法：氨基己糖法 紫外分光光度法 第一节 多糖类药品检验 三、大豆磷脂 加硫酸硝酸等（凯氏烧瓶） 磷酸 磷钼酸 钼蓝 用磷酸二氢钾作标准液比较测定吸光度，计算大豆 磷脂含量。 第二节 脂类药品检验 钼酸铵试剂 亚硫酸铜/对苯二酚 四、辅酶Q10 含量测定 根据氧化型还原型吸收波长不同，利用吸光度差值计算含量。氧化型辅酶Q10，经还原剂硼氢化钾还原，275nm吸光度降低差值。 高效液相色谱法 第二节 脂类药品检验 一、定性鉴别 三磷酸腺苷：样品水解加氯化钡试液产生白色沉淀。三磷酸腺苷：样品酸解加间苯三酚，沸水浴中加热呈玫瑰红。 肌苷：在酸性条件下，分子中核糖基脱水转化为糖醛与3,5-二羟基甲苯反应生成绿色复合物。 紫外光谱法：肌苷共轭共键，较强紫外吸收。254nm波长有最大吸收，222nm波长最小吸收。 第三节 核酸类药品检验 二、特殊杂质检查 核酸类药物由于分解作用产生一些杂质，可用纸色谱法，纸电泳法等检测。 三、含量测定 核苷酸具有共轭双键的嘌呤或嘧啶碱基，强烈紫外吸收，可采用紫外分光光度法进行核酸类药物含量测定 第三节 核酸类药品检验 例：三磷酸腺苷二钠 鉴别 钼酸铵、间苯三酚 检查 一般杂质检查 特殊杂质检查：ADP，A