转染RhoA基因对树突状细胞抗胃癌功能的影响.pdfVIP

· 864· 年11月第22卷第11期 Chin J Gen Surg，November 2007．V01．22．N0．11 ． 论著 ． 转染RhoA基因对树突状细胞 抗胃癌功能的影响 孙华文 李敏 邹力 童仕伦 赫杰 【摘要】 目的 研究转染RhoA基因对树突状细胞(Dc)免疫功能的影响，观察修饰后的Dc在 体外诱导高效而特异的抗胃癌免疫效应。 方法 用增强型绿色荧光蛋白标记的RhoA重组腺病毒 载体作为介质，将RhoA基因转染入DC，用RT—PCR法检测培养上清RhoA基因的表达。检测这种 DC分泌细胞因子IL一12、TNF—d的功能，以及表面分子CDlc~、CD83、MHC—II、CD80、CD86的表达，用 M 丌法诱导人特异的细胞毒性T淋巴细胞的能力。 结果 培养上清中均可以检测到RhoA基因表 达；在这种转基因DC的上清中IL-12、TNF—d含量分别为(301±24)和(418±64)Pg／ml，明显比非转 染的DC组高，P0．05；转基因DC表面高表达CDla(70．13±0．03)、CD83(68．10±0．03)、MHC．II (69．73±0．13)、CD80(78．73±0．25)、CD86(74．20±0．05)，而在非转染的DC中是低表达的；经转染 RhoA基因的DC提呈的T细胞对胃癌细胞的杀伤率为87％，而未修饰的DC杀伤作用较低。 结论 RhoA基因转染修饰的DC能诱导细胞毒性T淋巴细胞的特异性，显著地提高DC的抗原提呈功能，在 体外能诱导高效而特异的抗胃癌免疫效应。 【关键词】 胃肿瘤；基因；转染；细胞因子类；树突状细胞 E t of dendHtic cell transfected with pEGFP-RhoA gene on the specific anti．gastric cancer d强cacy SUN Hua—Well,。L1 Min．Z0U Li．ToNG Shi—lun．HE J ．Department of Gastrointestinal Surgery Renmin HospitaZ．阮 ^an University． M n 430060．China Corresponding author：SUN Hua．wen．E．mail：sunhuawen888@ 163．com 【Abstract】 Objective To investigate the effect of dendritic cell s(DCs)transfected with pEGFP- RhoA gene．and to observe the specific anti—gastric cancer immunological resuh induced by modified DC cells in vitro． Methods pEGFP．RhoA gene was transfected to DCs cells with adenovirus．pEGFP．RhoA expression could be detected both in DCs cells and in cell cuhure supernatant by RT—PCR．IL一12．TNF—d． CD1 d．CD83，MHC II，CD80 and CD86 were detected．The competence of inducing human specific cytotoxic T lymphocyte(CTLs)was also detected with MIT． Results pEGFP—RhoA expression could be detected both in DCs which were transfected with pEGFP．RhoA cDNA and in cell cuhure supernatant．IL一12 and TNF—d level was(301±24)and(418±64)Pg／ml respectively，which was much higher than in natural DC cells(P0．05)．CD1d(70．13±0．03)、CD83(68．10±0．03)、MHC-II(69．73±0