水产微生物基础实训教学大纲.docVIP

《水产微生物基础实训》教学大纲 学分：2 学时：32学时 适用专业：水产养殖、水环境监测专业 课程的性质与目的 课程目的：通过实验使学生掌握微生物实验技术的基本操作，学会培养基的配 制和消毒灭菌，理解无菌操作的概念，然后逐步掌握显微镜观察、无菌操作、分离、纯化和培养等一系列基本操作；同时注重综合性、实用性，使学生在学习了基本操作的基础上能举一反三，应用于实践，从而培养学生独立解决问题、开展工作的能力，进一步启发和提高学生的创造意识和创新能力。 课程性质：水产微生物实验是高职院校水产相关专业必须掌握的基本实验技能 课。为学生今后进一步学习《水产动物疾病防治技术》、《海洋环境生物监测》等课程打下良好基础。 授课对象：水产养殖、水环境监测等专业的高职学生。 先修课程：相关的生物和化学实验操作等。 后续课程：《水产动物疾病防治技术》、《海洋环境生物监测》等。 教学基本要求 要求学生掌握基本的无菌操作，建立相对无菌的概念，以及显微镜观察、微生物分 离、纯化和培养等一系列基本操作技能，并能独立应用这些基本技能开展综合性实验进行相关的水产微生物检验实验或分离水产动物病原微生物。 三、考核方式： 考核方式以实操进行考核，实操试卷参照职业技能鉴定的要求进行设计，采用百分制，直接作为实验课的成绩计入。 四、实训内容与课时分配 序号 实验项目名称 学时 实验性质 实验类型 1 微生物实验器材、物品的准备 2 必开 基本操作 2 培养基的配制 2 必开 基本操作 3 消毒与灭菌 2 必开 基本操作 4 微生物的分离、纯培养与菌种保藏 4 必开 综合 5 显微镜的使用 2 必开 基本操作 6 细菌涂片的制备及常用染色法 4 必开 基本操作 7 细菌特殊构造染色法 2 必开 基本操作 8 酵母菌、霉菌的形态观察 2 必开 验证 9 微生物大小及数量测定 6 必开 基本操作 10 细菌的生理生化反应 4 必开 验证 11 理化因素对微生物的影响 2 必开 验证 五、教学内容 训练一 微生物实验器材及物品准备 【目的要求】通过训练使学生了解微生物实验操作中常用的器材及物品的准备工作（包括洗涤、包扎等）；掌握培养皿、移液管、试管的包扎，棉塞的制作，掌握微生物实验室常用仪器的使用方法和注意事项。 【实验材料和用品】棉花，试管，移液管，培养皿，报纸，实验常见仪器设备 【重点】培养皿、移液管、锥形瓶的包扎方法，玻璃仪器的洗涤要求。 【难点】移液管顶端塞一段棉花的制作方法；棉塞的制作方法。 训练二 培养基的配制 【目的要求】通过训练使学生掌握配制培养基的一般方法和步骤。 【实验材料和用品】 试剂：牛肉膏，蛋白胨，NaCl，琼脂，1mol/LNaOH,1mol/LHCl,马铃薯，蔗糖等 仪器：试管，锥形瓶，烧杯，量筒，玻棒，培养基分装装置，天平，牛角勺，PH试纸，棉花，牛皮纸，麻绳，纱布 【重点】培养基的配制方法及注意事项 【难点】培养基PH值的调节；斜面培养基的分装要求；倒平板操作 训练三 消毒与灭菌 【目的要求】掌握干热灭菌箱、高压蒸气灭菌锅的具体操作步骤、注意事项和应用范围，掌握实验室各种消毒和灭菌方法及技术。 【实验材料和用品】 试剂：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基 仪器：已包扎的玻璃器皿、酒精灯、接种环、斜面培养基、无菌操作箱、干热灭菌箱、高压蒸气灭菌锅 【重点】干热灭菌箱、高压蒸气灭菌锅的具体操作及注意事项 【难点】干热灭菌箱、高压蒸气灭菌锅操作的注意事项； 训练四 微生物的分离、纯培养与菌种保藏 【目的要求】掌握分离微生物的各种方法（稀释平板分离法、划线分离法、涂布分离法和单细胞分离法），掌握微生物培养的一般方法及纯化菌种的一般步骤，掌握基本的无菌操作技术。 【实验材料和用品】 样品：环境中水样或水族箱的水样 培养基与试剂：牛肉膏蛋白胨培养基 器皿：培养皿、涂布棒、刀子、酒精灯、移液管、接种环、锥形瓶、试管、玻璃珠 【重点】划线分离法、涂布分离法；无菌操作技术；接种技术 【难点】划线分离法、涂布分离法、无菌操作 训练五 显微镜的使用 【目的要求】通过观察永久玻片掌握普通光学显微镜的构造、性能及使用方法；学会观察并绘图记录微生物的个体形态。 【实验材料和用品】 试剂：香柏油，二甲苯 仪器：显微镜，擦镜纸；永久玻片 【重点】油镜的使用、油镜的清洗保养。 【难点】光强的调节；聚光器的使用；油镜的使用；油镜的彻底清洗。 训练六 细菌涂片的制备及常用染色法 【目的要求】巩固显微镜（特别是油镜）的使用方法，巩固无菌操作技术；学习细菌涂片制作，掌握细菌的单染色法和革兰氏染色法。 【实验材料和用品】 菌种：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的营养琼脂斜面培养物 染色剂：吕氏碱性美蓝染液，革兰氏染色液 仪器：显微镜，酒精灯，载玻片，接种环，擦镜纸，生理盐