血液分离机制备浓缩血小板经验（广州）.PPTVIP

操作步骤7——离心8# * 操作步骤8——夹板分离 * 操作步骤9、10 * 操作9——检查成品外观，剔除不合格品 操作10——录入产品信息，叠放整齐；产品发出，移交待检库 BC法的优势 制备过程相对PRP法要求简单 制备效率高（混合血小板） 产品质量稳定 对血浆的质量有保证 * * 谢谢！ 血液分离机制备浓缩血小板经验 广州血液中心 曾四海 * 血小板制品的分类 普通血小板 浓缩血小板 单采血小板 特制血小板 去除大部分血浆的血小板、添加液血小板 少白细胞血小板、病原体灭活血小板 洗涤血小板 冰冻血小板 * 血小板的临床意义 血小板输注 预防性血小板输注 治疗性血小板输注 使用抑制血小板药物后输注 免疫性（特发性）血小板减少性紫癜 * 广州血液中心制备浓缩血小板的历史 经历了三个发展时期 成分输血普及时期，上世纪八十年代后期到九十年代中期，手工浓缩血小板是临床使用的血小板主要来源；机采血小板开始应用，并逐渐替代手工浓缩血小板。 本世纪前十年，机采血小板广泛应用，但采集量未能完全满足临床需求，同时对于血液资源的保护和血袋质量的提高，浓缩血小板抢回部分市场；但国产浓缩血小板保存袋一直未取得国家生产许可，影响了制备和应用。 * 广州血液中心制备浓缩血小板的历史 经历了三个发展时期 近年来，临床对血小板的需求量迅速增加，机采血小板的采集压力更大；另一方面宝贵的血液资源没有得到充分的利用。 2014年7月，国家药监局批准国产血小板保存袋上市，四川南格尔公司取得“常温血小板保存袋”生产许可，成为目前国产血小板袋唯一的合法制造商。 我们从2015年12月开始恢复向临床供应浓缩血小板。 * 浓缩血小板制备的两种方法 富血小板血浆法，简称PRP法 通过轻度离心，使血浆、红细胞（包括白细胞）实现分层，大部分血小板停留在血浆层中； 再将分离得到的富含血小板血浆进行重度离心，血小板及其他细胞成分停留在血袋的底部，将上层血浆转移到另一个袋子，剩余50毫升左右血浆和沉淀物，就得到浓缩血小板 ； 保存前需要静置解聚。 * 浓缩血小板制备的两种方法 白膜法，Buffy Coat，简称BC法 通过中等强度离心，使血小板富集到血浆层和红细胞层之间的白膜层中；转移大部分血浆到其他空袋，50毫升血浆加上约25克的白膜层转移到另一个空袋。 白膜袋在室温下静置一小时以上，再轻度离心，分离上层血浆层到血小板保存袋，得到浓缩血小板。 该法制备的浓缩血小板保存前不需要静置。 * 国家标准的比较 2001版 血小板≥4. 0×1010 红细胞≤2.0 ×109 容量50 ～70 m L pH 6.0～7.4 400ml全血制备 2012版 血小板≥4. 0×1010 红细胞≤2.0 ×109 容量50 ～76 m L pH 6.4～7.4 400ml全血制备 * 均未提及白细胞含量的控制； 自单采血小板推论：白细胞≤1.0 ×108/400ml全血制备 早期制备浓缩血小板 的方法 上世纪九十年代 采用富小板血浆法，PRP法 采用分浆夹纯手工制备，单袋采集血液，血液成分转移必须在无菌室内制备 受多种条件制约：血液采集时间、离心机、血袋、无菌连接 血小板回收率低，红细胞、白细胞残留较多 血小板外观偏红，保存期短 * 2007年～2012年9月期间 部分缓解了血小板供应紧张的状况 受到设备等条件的制约，依旧采用PRP法 原料血液采用联袋采集，制备过程不需要在无菌室内进行 采用血液分离机辅助分离，提高了制备的效率，期间约制备了八万袋浓缩血小板 受制备方法的制约和原料血液的不确定性，不能保证血小板能够富集到血浆层中，血小板回收率依旧不稳定 * 现阶段 整体质量水平有了质的飞跃 采用BC法，确保绝大部分血小板富集到白膜层中，保证血小板回收率的稳定性 利用设备辅助分离，确保每一份产品容量的稳定性 BC法的制备原理可以减少血浆成分在室温条件下的停留时间，提高新鲜血浆的质量和利用率 但该方法使每一袋红细胞损失2克血红蛋白 * 现阶段 我们在提供浓缩血小板的基础上 当国家或部颁标准允许时，可以向临床提供混合血小板制品，总体质量可以达到或超过机采血小板的水平 混合血小板可以实现完全由血液分离机制备，减少人工操作步骤 由于缩短了血浆在室温的停留时间，部分达到重量要求的血浆还可以用于制备冷沉淀 * 2008年～2012年血小板质控记录分析 质量检测 血小板(n=188) 4.71±1.29 ×1010 (1.25～8.6)，合格率：77.66% 红细胞(n=188) 0.85±0.56×109(0.06～3.7)，合格率： 95.21% 白细胞(n=188) 0.41±0.48×108 (0～2.7)，合格率： 92.55% * BC法的确认过程 1、血小板收集效率最高的离心条件 240