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红花籽粕抗氧化肽的制备及抗氧化活性研究.pdfVIP

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红花籽粕抗氧化肽的制备及抗氧化活性研究

Activityofsafflowermealpreparationantioxidantpeptideandantioxidant ADissertationSubmittedto ShiheziUniversity InPartialFulfillmentoftheRequirements fortheDegreeof MasterofAgriculture By SunLi (Foodprocessingandsecurity) DissertationSupervisor:Prof.ChenJi-luan AssistantProf.MaoXiao-ying June,2014 万方数据 万方数据 摘要 随着生活水平的提高,人们对食品和营养的需求越来越多,天然的抗氧化肽在食品和医药领域 中具有潜在的应用前景,并且越来越受到人们的关注。红花籽蛋白作为一种新型的蛋白资源,具有 很高的开发研究价值。本课题研究主要内容是针对新疆红花籽粕蛋白提取以及红花籽蛋白抗氧化肽 的制备工艺、肽的分离纯化及其体外抗氧化活性的研究。 论文首先研究了红花籽蛋白抗氧化肽的酶解工艺。通过单因素试验,响应面回归分析得到酶解 的最佳工艺为:采用Alcalase2.4L碱性蛋白酶为酶源,水解时间2h,水解温度49℃,pH值为8.6, 酶添加量7700u/g,底物浓度5.0%。最优酶解条件下,得到酶解液的还原能力为 1.017,具有较好的 抗氧化活性,此时红花籽蛋白的水解度为6.389%。 采用膜过滤对制备的红花籽抗氧化肽粗品进行超滤分级,将红花籽抗氧化肽粗品按照分子量范 围分为5KDa、10-5KDa及10KDa三种红花籽抗氧化肽,并对这三种肽进行DPPH 自由基清除能力 测定。结果表明分子量 5KDa 以下的红花籽抗氧化肽的抗氧化活性最高,所以,选取5KDa 以下 的红花籽抗氧化肽进行后续的凝胶层析纯化。 分子量小于5KDa的红花籽抗氧化肽经SephadexG-25凝胶柱色谱进一步分离纯化后,得到了三 个洗脱峰,根据SephadexG-25绘制的标准曲线可知:第三个洗脱峰有较强的抗氧化活性,分子量范 围 885Da左右。 通过对还原能力以及对超氧阴离子、羟自由基和DPPH 自由基清除能力的测定,考察了红花籽 抗氧化活性肽的体外抗氧化活性。依据实验结果,实验所制备的红花籽粕蛋白酶解所得的肽,具有 较强的体外抗氧化活性,抗氧化性能介于Vc和BHT之间。 关键词:红花籽蛋白,酶解,抗氧化肽,分离纯化,抗氧化活性 I 万方数据 Abstract With the improvement of living standards, the demand of food and nutrition is becoming more and more natural. Antioxidant peptides have potential applications in the food and pharmaceuticalsectors,andmoreandmorepeopleliketoattentionit.Asanovelproteinresources, safflowerprotein’sresearchanddeve

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