分光光度法测定竹节人参甲醇提取物中皂甙含量.pdfVIP

应用化学 Vol. 26 No.3 第26 卷第3 期 CHINESE JOURNAL OF APPUED CHEMISTRY Mar.2α)9 2朋年3 月 分光光度法测定竹节人参甲醇提取物中皂前含量 向东山川 霍 E昆b (α生物资源保护与利用湖北省重点实验室，湖北民族学院生物技术研究所 恩施445仪趴 b 湖北民族学院化学与环境工程学院 恩施) 摘 要采用分光光度法，以人参皂戒Rbl 为对照，选择波长为 571 nm ，建立了测定竹节人参皂试含量的方 法。实验结果表明，皂试含量在 1 ∞ -6∞问之间，皂试的质量与吸光度具有明显线性关系。在此范围内，建 立的皂民质量(附)和吸光度之间回归方程为 Y=392. 47x + 104. 18(R2 =0.9985) 。检测方法的加样回收率为 99.549品， RSD 为0.979奋。测定方法与高效液相色谱法的测定结果无显著差异。 关键词 竹节人参，皂试，分光光度法，测定 中图分类号:0657.3 文献标识码:A 文章编号:10∞-0518(2仪渺)03-0358-03 竹节人参属五加科植物[1] (别名:竹节三七、竹节参、白三七、北三七、大叶三七) ，兼具我国北药人 参和南药三七之功效，在民间有草药之王的美誉。常用于治疗病后虚弱，肺结核咯血，产后血痕腹痛， 寒温脾痛，跌打损伤等症[2] ，属我同特有珍贵中药材资源。现代药理学研究表明，竹节人参主要活性物 质为皂试类、多糖、氨基酸及少量的挥发性油等[3] 。在这些活性物质中，研究最多的是其皂试类化合物。 这类物质具有抑制肿瘤、抗炎、镇痛、镇静、抗病毒、免疫调节提高学习记忆能力保护脑损伤及心肌缺 血损伤、抗衰老及抗疲劳等多方面的功能[4 ， 5] 。目前，对竹节人参皂民的测定常用 HPLC 法，但由于 HPLC 法仪器昂贵，因此，建立竹节人参总皂戒的简便检测方法，具有重要的现实意义。资料表明间，竹 节人参皂戒类化合物在高氯酸作用下，与香草醒反应，生成紫红色化合物，在一定浓度范罔内颜色的深 浅与其浓度成正比。本文据此建立了分光光度法快速、简便检测竹节人参皂试含量的方法。 实验材料为人工栽培3 年生竹节人参根(湖北省中药材研究所) ，人参皂试Rbl 为对照品(中国药 品生物制品检定所) ，其它试剂均为分析纯。 553/54 型紫外可见分光光度汁(上海棱光科学仪器厂) ; LC-lOAVP 型高效液相色谱仪(日本岛津)。 竹节人参样品溶液的制备:竹节人参置鼓风干燥箱中ω ℃烘干，粉碎至全部通过0.25 mm 筛。精 密称取样品粉末约2 g ，置索氏提取器中，加人80 mL 乙酶，加热回流2h 后，弃去乙酷液。药渣挥去乙酷 再置于索氏提取器中，加入80 mL 甲醇，温度加热提取2 h ，取甲醇提取液，挥干，残渣中加水 15 mL 溶解 后，用水饱和的正丁醇萃取(15 mL x 5) ，合并正丁醇萃取液，用质量分数为 1% 的 NaOH 溶液洗涤 (15 mL x3) ，正丁醇相用正丁醇饱和的水洗涤(15 mL x3) ，正丁醇相蒸干后，残渣加甲醇榕解，定榕于 25 mL 的容量瓶中，为供试品榕液。 干燥至恒重的人参皂试 测定方法:精密称取经P 0 Rbl 约 12.5 mg，加甲醇溶解定容至25 mL，制 2 5 成0.5 glL 的人参皂试对照品溶液。分别精密吸取对照品溶液 1 ∞ μL 和供试品溶液50μL，置于干燥 具塞试管中。在水浴上挥干溶剂，加入新配制的质量分数为 5% 香草醒冰醋酸榕液0.2 mL，高氯酸 。.8 mL，于6Ot:恒温水浴加热 15 mino 取出，流水冷却5 min ,1JO5 mL 冰醋酸，摇匀以试剂空白为参比， 在分光光度计上，扫描5∞ -7∞ nm 波长范围吸收光谱，2 种溶攘的吸收光谱相似，确定最大吸收波长 为571 nm。 结果与讨论 按测定方法，以试剂空白为参比，对 10 个不同浓度的对照品溶液测定5