化学发光酶免疫法测定游离三碘甲腺原氨酸.pdfVIP

分析化学 (FENXl HUAXUE) 研究报告 第5 期 第36 卷 Chin四e Joumal of Analytical Chemislry 609 -613 则8 年5 月 化学发光酶免疫法测定游离三破甲腺原氨酸 林珍1 ，2 王栩2 任世奇1 ，2 陈国南l 李振甲3 林金明 -2 I (福州大学化掌化工学院，福州 35α附2) 2( 清华大学化学系.北京 10∞84) 3( 北京科美东雅生物技术有限公司， 北京 l仪盼的 摘 要 以辣根过氧化物酶为三殡甲腺原氨被类似物的标记物，鲁米i着为化学发光反应底物，建立了-种高 灵敏度化学发光免疫检测游离三顿甲腺原氨酸的方法。该法线性范画为O. 90 - 80 nglL. 批内变异小于 12.1%. 批间相对标准偏差均小于 15% ，其余各项指标均良好。利用本法对血消样品进行了测定.关于甲状 腺机能亢迸组病人的临床诊断符合率达到 83.3%。 与其它化学发光免疫分析方法比较所得相关系数为 0.9∞5。在方法条件选择上，以尽可能保持游离激素和蛋白结合激素之间的平衡为原则，提高游离三硕甲腺 原氨酸浓度测定的准确性。 关.词 化学2t光，酶免疫分析，游离三碗甲腺原氨酸，类似物 1 引言 人体内65% 三破甲腺原氨酸(triiodothyronine，飞)由甲状腺产生.35%在外周组织由甲状熄素转化 而来。，它用于维持甲状腺功能，参加糖、脂类和蛋白质3 大营养物质的代谢生理作用。三飘甲腺原氨酸 是甲状腺功能亢进的首选指标之一，并可作为判断疗效的可靠指标。 99.7% 三峡甲腺原氨酸在人体内 都以与蛋白结合的形式存在，而真正发挥生理效应的游离主破甲腺原氨酸(free triiodothyronine ,IT )含 3 的测 量非常低。 在临床检测方面，体内蛋白浓度以及结合能力变化可以影响总飞的测定。因此.IT 3 定对甲状腺功能的判断更有意义。 针对付 的浓度很低，键要高灵敏的分析方法;需要排除样品中 的临床检测，主要有两个难点:IT 3 3 ( 1.2) 、自身抗体( 3，4J 以及药物等多种物质的干扰等。基于这些特点，国内外有关町，免疫检 的结合蛋白 测的方法还不多，其测定方法主要有平衡透析法(equilibrium dialysis) [}、两步法川和抗体标记法(7 ，8) 。 平衡透析法是在一个物理分离游离和蛋白综合激素之后，使用放射免疫分析的方法对游离部分进行测 定。 但由于其操作过程复杂、费时、并且不能完全排除干扰因素，不适用于临床检测。 两步法中，先用抗 体包被固相，加入待测血清进行温育之后，分离未结合部分，除去甲状腺结合蛋白的干扰，比平衡透析 法相对简单些。可是由于分步温育精密度较差，测定大批样品时有漂移变异的可能。 抗体标记法是标 记三破甲腺原氨酸的抗体，虽然该方法抗体的消耗量较大，对抗体的纯度要求也比较高，但是在没有其 它更好的方法条件下 择性的兔疫分析技术，使用免疫分析的特异性对抗原进行识别和分离，利用化学发光优异的检测能 力(9.IOJ 。本研究建立了 IT IT 在临床检测中出现的各种困难。在具体 化学发光免疫分析法，克服了 3