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猪冷冻精液在规模化猪场中的应用实践 才永娟 贺佳伟 黄如渠 邓东养 钟日聪 （湛江广垦沃而多原种猪有限公司 广东湛江 524348） 摘要：本文阐述了猪冷冻精液的发展简史及在养猪业生产中的实际应用价值及其局限性，着重表述了从冻精保存，稀释液的配制，冻精的解冻，冻精的稀释至用于配种的整个过程，及冷冻精液在规模化猪场中实践应用过程中的操作情况和效果。 关键词：猪；冷冻精液；实践应用 猪的人工授精技术已经广泛应用于畜牧业生产，所用精液多为常规液态保存精液，但液态精液不便于远距离运输，不能充分发挥种公猪的优良性能，所以人们的视线逐渐转移到冷冻精液上。猪冷冻精液技术是指利用干冰（-79 ℃）、液氮（-196 ℃）、液氦（-269 ℃）等作冷却源，将精液特殊处理后冷冻，保存在超低温的液氮（-196 ℃）状态下，达到长期保存的目的，并且解冻后输精的过程。自Polge[1]等1956年开始猪的冻精研究试验以来，许多国家相继开展了此项技术的研究，目标是提高它的繁殖成绩，达到现实生产可接受的水平。我国养猪业已从传统副业型转变到效益型，专业化的瘦肉产品生产，猪的常温液态保存精液技术已经被大面积的推广和应用到养猪生产实践中。精液冷冻保存是人工授精的一项重大变革，不但解决了精液长期保存的问题，同时也有利于本地猪种资源保护，还使得精液长期保存，便于开展省际、国际之间的协作，提高了优良种猪的利用率；而且极大地延长了种猪基因物质的使用寿命，使优良种猪在短期进行后裔测定，在保留和恢复精液供应、血统更新、引种降低生产成本等方面均有重要意义[2]。随着全国性、区域性种猪联合育种工作的深入开展，猪的冷冻精液技术研究越来越显得迫切。 1 猪精液冷冻技术研究简史 从意大利人Spallanzani最早开始研究哺乳动物精液冷冻开始至今有200多年的历史。 猪的精液冷冻研究是从1949年英国人Polge等发现甘油(丙三醇)对牛精子具有抗冻保护作用后开始的。1956年，他首次报道了应用这个原理进行猪精液的冷冻操作，并进行人工授精[1]。1957年Hess等将猪冻精经子宫颈输入，并产下仔猪。1975年，Pursel[3]等发明了简便的猪精液冷冻和解冻方法，从此打开了猪冷冻精液的商品化之路。 2 猪精液冷冻保存的意义 由于冻精可以使优良基因得到长期的保存，延长公猪使用年限，而不受该公猪死亡、损失、采精间隔或繁殖不育的限制，有利于人为地使用高性能水平的种公猪与较多数量的母猪配种，获得更大的遗传进展。引进国外高性能公猪冻精取代活体公猪的引进，使种猪选择扩大到世界范围的各群体进行成为可能，不受时间和地理位置差异的限制，可节省外汇支出。生物安全的保证，有利于人工授精体系的完善，公猪冷冻精液可以在后裔测定或疾病检测后才开始大量供应，为稳定的遗传发展和严格的生物安全提供额外保障。从健康角度考虑，冻精为疾病检测提供了足够的时间，冻精还为大型的人工授精站暴发疾病时提供了稳定的精液供应保障。 3 猪精液冷冻保存的局限性 当前，猪的冻精应用估计占世界人工授精不到1%的比例，这个比例在许多年里都没有大的变化[4]，其原因： 3.1 冻精没有得到大面积应用的主要原因是繁殖成绩不理想。冻精分娩率为40%～70%，较保存精液低20%～30%；仔猪数为7～10头，较常温精液少2～3头。 3.2 冻精的体外活力和解冻后受精能力在不同的公猪个体之间存在很大的差异。 3.3 液态保存精液每剂只需要20～30亿精子数，而冻精每剂需要更多的精子，一般为50～60亿。 3.4 成本高，从工作量和实验室设备考虑，冷冻和解冻是一个耗费资金的过程。 3.5 需要可靠的实验室设备以供准确测试精液质量，最大的问题是解决体外精子的活力与其实际的受精力、受胎效果的相关性。 3.6 把握适当输精的时机。冻精输入母猪体内后的理想受精时间较液态保存精液大大缩短。 因此，继续改进猪精子的冷冻和解冻操作方案仍是养猪业面临的一个课题。猪精子与其他家畜相比，有许多不同之处。猪一次射精量大，采精后对外界温度的突然改变相当敏感（所谓的“冷休克”反应）。冷冻精液技术的成功与否，关键在于影响猪精子在冷冻和解冻过程中失去活力、保持受精能力等多因素的理解和监控。这些因素包括外界因素、精子本身生物学特性、种公猪个体差异和每次采精的质量差异。外界因素有稀释液的组成成分、抗冻剂的选择及其质量浓度、稀释比例和冷却或缓冲速度、冷冻和解冻所采取的方法。遗憾的是我们只能通过改变外界因素来优化冷冻精液操作过程和提高繁殖成绩[5-6]。 为了适应猪肉的高效、优质生产需要，全世界的种猪都在不断地向更高遗传水平的群体所转变，在一个国家和地区范围内，采用保存3～5d的液态精液或者活种猪进行遗传物质传递已经足够，但从我国幅员辽阔的地域，种猪的跨国贸易和在遗传交流时减少疾病传播的角度考