种子生物学试验-东北农业大学植物科学与技术试验教学中心.DOC

东北农业大学本科实验课程教学大纲 实验课名称：种子生物学实验 实验课英文名称：Experiments for Seed Biology 一、课程课号 适用专业：农学、种子科学与工程专业等。 实验总学时（周学时）：24 学分：0.5 开出实验个数：（验证实验 1 个；综合实验 1 个；设计实验 1 个；创新性实验 0 个） 应开实验学期：第3学期 二、实验课程简介 种子生物学实验课作为种子生物学理论课程的重要辅助教学内容，主要任务是结合现有实验条件，在实验课程中体现种子生物学理论课程中实验性强的内容，强化学生理解理论知识的同时，让学生掌握实验技能技巧，提高应用能力，为独立进行实验设计奠定基础。 三、实验教学目标及基本要求 种子生物学实验以和理论课程密切相关的农作物种子萌发过程中吸水力和物质效率的测定、种子纯度鉴定原理与方法、不同作物不同贮藏时间的种子活力和发芽能力等内容进行开展，达到让学生在学习理论知识同时提高实践能力、分析能力和设计能力。 四、教材及主要参考书 1、宋松泉种子生物学研究指南科学出版社宋松泉独立、正确完成预习报告 20分 根据实验目的要求，顺利、正确完成实验操作30分 按时完成实验报告，书写规范20分，结果分析与处理正确20分，（若结果不正确，但能找出原因，可得10分） 对整个实验做出评价，提出建设性或改进意见，得10分。 、仪器设备及试剂 仪器设备 。 试剂 4、 5、结果计算 HPG-280BX 2 2 电导仪 DDS-307A 4 3 烧杯直径80mm 塑料网 种子吸胀初期，细胞膜重建和损伤修复的能力影响电解质和可溶性物质外渗的程度，重建膜完整性的速度越快，外渗物越少。高活力的种子，重建膜的速度和修复损伤的程度快于和好于低活力种子。因此，高活力种子浸泡液的电导率低于低活力的种子。取试样两份各50粒种称重至小数2位。取出玻璃烧杯3个，直径最好是80mm+5mm。用热水和无离子水洗净。将试样放人杯内加无离子水250ml，另一杯内加无离子水作对照，于20浸泡24h，然后用清洁塑料网取出种子。用电导仪测出浸泡液和对照的电导率，单位微欧姆（μΩ），国际采用单位微西门子（μS），二者等同。再将样品电导率减去对照电导率。按以下公式求出两份试样平均电导率。 电导率=样品1的值样品1的50粒种子重量样品2的值样品2的50粒种子重量单位为μScm-1g-1，2份样品电导率差值超过4时则应重做试验。当电导率高于30时，则容许差距为5。实验证明电导率与田间出苗率成明显负相关。但试验结果受许多因素，如种子大小、完整性、种子水分、容器大小、溶液体积等影响，应予注意。DYY-Ⅲ高压电泳仪 3 2 电泳槽 DYCZ-24DN型 5 3 离心机 TGL-16B型/12000转 1 4 天平 1/1000电子天平 2 5 离心管 1ml的聚丙烯塑料离心管 1000 6 研钵 10cm直径 5 7 试剂瓶 100ml、1000ml 各30个 8 微量进样器 1~50ul 5 9 量筒 50ml、250ml 各5个 10 烧杯 100ml、3000ml 各10个 11 枪头 20ul、1000ul 各1袋 12 Watman定性滤纸 12cm 5盒 4．实验原理 聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺 (简称Acr) 和交联剂N，N’—亚甲基双丙烯酰胺（简称Bis）在催化剂作用下，聚合交联而成的具有网状立体结构的凝胶，并以此为支持物进行电泳。 聚丙烯酰胺凝胶电泳可根据不同蛋白质分子所带电荷的差异及分子大小的不同所产生的不同迁移率将蛋白质分离成若干条区带，如果分离纯化的样品中只含有同一种蛋白质，蛋白质样品电泳后，就应只分离出一条区带。