农杆菌介导的白芥防御素基因对甘蓝型油菜的转化.pdfVIP

2007年 12月 四川大学学报(自然科学版) Dec．2007 第44卷第6期 Journal of Sichuan University(Natural Science Edition) Vo1．44 No．6 文章编号：0490—6756(2007)06—1335 04 农杆菌介导的白芥防御素基因 对甘蓝型油菜的转化 王贺一，罗 勤，吴 俊，李旭峰，杨 毅 (四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室，成都610064) 摘 要：通过根癌农杆菌介导将正向和反向插入白芥防御素基因的pBI121重组质粒转入甘 蓝型油菜的下胚轴，经组织培养和抗性筛选获得再生植株．PCR检测后，初步鉴定为阳性植 株． 关键词：根癌农杆菌；植物防御素；白芥基因；油菜；转基因 中图分类号：Q81 文献标识码：A Genetic transformation of Sad to rape(Brassica napus L．) mediated by Agrobacterium tumefaciens WANG He-yl，LUO Qin，WUJun，LI Xu—feng，YAN G Yi (Key Laboratory of Bio-resources and Eco-environment of Ministry of Education，School of Life Science，Sichuan University，Chengdu，Sichuan 610064，China) Abstract~The hypocotyls of rape were transformed with Agrobacterium tumefaciens EHA105 containing the binary plant expression vector pBI121 plasmid harboring Sad gene cDNA sequence in sense and antisense ori— entation．Some regenerated rape plants were developed through the tissue culture with kanamycin resistance selection．PCR analysis confirm ed that the foreign Sad gene was integrated into the rape genome． Key words：Agrobacterium tumefaciens，plant defensins gene，Sinapis alba L．(Sad)，Brassica napus L．， tran sgene 植物先天性非特异性免疫的重要组成部分．它保 1 引 言 守的含有8个Cys，而形成4个二硫键．典型的植 农作物的抗病基因和优质、高产基因一直是国 物防御素包含一条三链的反平行的肛折叠和一段 内外植物基因克隆研究的热点和重点．做为世界 a一螺旋…1．其作用机理是作用于靶细胞膜，改变膜 四大油料作物之一的油菜，近年来真菌等病害造成 的通透性，导致菌体细胞cd 聚集，K 泄露和介 了产量和品质的大幅下降．如能通过基因工程手 质碱性化，从而杀死真菌或抑制菌体的生长 2． 段对油菜进行转基因改良，使其自身具有良好的抗 植物防御素的最大优点是具有广谱高效的抗 病害能力，将具有重要的经济价值和环保意义． 微生物活性，能有效的杀灭G 、G一、某些真菌、螺 植物防御素(Plant defensins)是一种存在于多 旋体、被膜病毒等微生物而对