微囊藻毒素LR、RR的提取和制备.pdfVIP

第22卷第4期 广 州 环 境 科 学 Vo1．22，No．4 10 2007年12月 GUANGZHOU ENVIRONMENTAL SCIENCES Dec．2007 微囊藻毒素I_R、Fil l的提取和制备 卫涛 向铮 冯小刚 张婧婧。 ( 温州医学院药学院化学教研室，浙江温州 325035； 东南大学纳米光催化研究中心，南京 210096； 南京理工大学化工学院，南京 210094) 摘 要 以天然水华蓝藻为原料，建立了以甲醇溶液提取、固相萃取和半制备色谱分离为主要步骤的微囊藻毒素分离纯化 方法。通过优化提取、提纯和制备条件，制备了～定量的微囊藻毒素MC—LR和MC—RR纯品，纯度可达98％以上，干燥后得 MC—RR和MC—LR分别为121．1、62．8 txg。 关键词 微囊藻毒素 提取 提纯 制备 随着环境污染和富营养化的加剧而引起内陆 (MC—LR、MC—RR)，纯度大于98％，为进一步研究 水体中有害蓝藻水华的频繁发生已成为国内外普 MCs提供了基础。 遍关注的环境问题。微囊藻毒素(Microcystins，MCs) 1 材料和方法 即为有害的蓝藻水华释放的一类具有强烈促癌作 用的肝毒素l】1，是一类环状七肽物质，其共同结构为 1．1 实验仪器 环(Ala·X—MeAsp／Asp—Z—Adda—Glu—Mdha／Dha)，其 Waters Alliance一2695型高效液相色谱仪一配 中x、z为2种可变的L一氨基酸。由于x和z的不 有Waters一2996型DAD二极管阵列检测器，Kros— 同以及Asp和Dha的甲基化，可以形成多种MCs mosil ODS一18 m色谱柱 (4．6 ITIm×250 mm瑞典) 变体，其中在我国较普遍存在的是MC—LR和 连接有c 保护预柱novepak；全自动固相萃取工作 MC—RR[21。MCs是一种公认的肝毒素和促癌剂，长期 站 (Autotrace station，Zymark)，C18玻璃固相萃取柱： 饮用含有MCs的水会对人的肝脏造成损伤，极端情 SUPELEAN(500 mg／6mL，SUPELCO，美国)；Waters 况下会危及到人的生命p1。随着水华污染问题的深 半制备型高效液相色谱仪一配有Waters一486型可 入研究，MCs在环境中的分布、迁移、积累和归宿等 调式紫外检测器，Alhech一426型电脑恒流泵， 环境行为，以及在环境污染治理方面受到环保工作 IxBondapakTM C】8制备柱(19 mm×300 mm，粒径为 者的特别关注 。到目前为止，对MCs的分布、结 10 Ixm，孔径为12．5 nm)。 构鉴定、含量检测、毒性评价、以及毒性机理等方面 RE一52A型旋转蒸发仪 (上海亚荣生化仪器 已做了大量工作，但MCs纯品的缺少成为困扰研究 厂)，TDL一40B离心机 (上海安亭科学仪器厂)，