项目二：发酵条件的优化及扩大培养.pptVIP

（1） 添加有关前体物质： 在发酵中添加前体物质将有利于产物的合成和显著提高产量，如苯乙酸及其衍生物被认为是青霉素的前体物质。 （2） 添加诱导物： 目前工业用微生物酶多数为诱导酶，如蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶等。 诱导物的存在能大大强化诱导酶的生物合成。 酶的正常底物或底物的类似物都可作为诱导物。 在各种微生物酶的发酵培养基中必须加入诱导物，例如淀粉、糊精或麦芽糖是淀粉酶或糖化酶的诱导物。只有添加这些物质的培养基，才能获得高产。 （3） 注意阻遏物或抑制剂的影响 培养基中存在反馈阻遏物或分解阻遏物均能影响酶的合成，降低发酵产量。 有些酶的抑制剂却能提高某些代谢产物的产量，最早利用抑制剂提高中间代谢物产量的例子是甘油发酵中加入亚硫酸钠。 在培养基配制时必须注意加入有益的抑制剂，而避免混入有害的抑制物。 有些种类的发酵生产对金属离子相当敏感，因为有些金属离子是中间代谢酶的抑制剂或激活剂。 因此对于有重大影响的金属离子必须严格控制。如柠檬酸发酵中铁、锰和锌离子都能明显影响产量，钙离子对细菌淀粉酶的生产有促进作用，而钴离子对葡萄糖异构酶的发酵是必需的，这些在培养基配制时都必须予以注意。 （4） 金属离子的影响 五. 四大类微生物的典型培养基 六. 配制培养基的基本流程 1. 原料称量和溶解 2. 酸碱度的调整 3. 培养基的过滤和澄清 4. 培养基的分装 5. 塞棉塞和包扎 6. 培养基灭菌 7. 培养基的储存 母液的配制 为什么要配制母液？ 因为该物质在培养基中含量太低难以称量 例：某A培养基中硫酸亚铁含量为0.1mg/L，要配制100ml该培养基，则需称量0.01mg硫酸亚铁，天平很难称量 解决办法：先配制1g/L的硫酸亚铁母液100ml （称量0.1g硫酸亚铁，溶于水后定容为100ml） 在配制A培养基时，取10微升该硫酸亚铁母液 培养基中某物质的终浓度×培养基体积=母液浓度×取用的母液体积 母液的配制 A培养基中硫酸亚铁含量为0.1mg/L，配制的硫酸亚铁母液浓度为1g/L，相当于浓缩了10000倍，所以该母液称为10000 ×的母液 注意到，要配制100ml的A培养基，需取10微升1g/L的硫酸亚铁母液，100ml是10微升的10000倍 所以，10000 ×的母液即母液浓度为培养基终浓度的10000倍，取用量为所配制培养基体积的1/10000 母液的配制 ①培养基的终浓度 ②要配制的培养基体积 ③母液的浓度 ④配培养基时取用母液体积 ③/ ① ④/2 0.1mg/L 100ml 1g/L 10ul 10000 1/ 10000 培养基中某物质的终浓度×培养基体积= 母液浓度×取用的母液体积 10000×的溶液即配制时浓缩10000倍，取用时按培养基体积的 1/10000取用 母液的配制 例：物质A在培养基中的终浓度为20mg/L，要配制100×的A母液100ml，应加入几克A 配500ml该培养基，应加入几毫升100 ×的A母液？ 某培养基中含B，把B配成20×的母液，问，要配200ml该培养基，应该加入几毫升20×的B母液？ 课堂作业 N=14 O=16 Ca=40 Cl=35.5 Mg=24 S=32 K=39 I=127 Zn=65 Cu=64 Co=59 本章节复习题库 1. 培养基的主要成分包括哪些 2. 以葡萄糖作为碳源有什么优缺点 3. 以淀粉为碳源有什么优点 4. 常见的有机氮源包括哪些 5. 什么叫做前体 6. 培养基的碳氮比过低可能造成什么影响 本章节复习题库 7. 细菌、放线菌、酵母菌、霉菌四大类微生物的典型培养基名称 8. 发酵产物是菌体细胞以及发酵产物是菌体代谢产物时，对培养基的碳氮比要求分别如何 9. 培养及配制的基本流程 10. 培养基配制的计算 第四章种子的扩大培养 一. 种子的制备 由保藏的菌种开始，经过逐级扩大培养，最后获得供生产车间发酵罐接种的足够数量和优质质量的种子。 适合工业化发酵生产的种子必须满足： 生长活力强，移种后能迅速生长，停滞期短 菌体的生理特性及生产能力稳定 菌体总量及浓度能满足发酵罐接种量的要求 无杂菌污染 1. 种子的制备流程 种子的制备一般包括在固体培养基上生产大量孢子的制备过程和在液体培养基中培养大量菌丝的种子制备过程。 固体孢子进罐 液体菌丝进罐 2. 种子罐种子制备 种子罐级数：种子在种子罐中扩大培养的次数； 发酵级数：种子罐的级